ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，ELISA試劑盒如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。今天我們將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題解決辦法總結(jié)于下，整理出應(yīng)對策略：
選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
標(biāo)本收集與保存：避免使用肉眼可見的溶血標(biāo)本、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本；2-8℃下，標(biāo)本可放置24-48小時，長期保存需放置-20℃下。請避免反復(fù)凍融。
試劑盒中會有提示，一般需要準(zhǔn)備的有：
- 洗滌液；用前配制；有的試劑盒會標(biāo)明，配好的4度下一般可以放一個月；如果沒有標(biāo)明，盡量用新鮮的，不要多配制。
- 顯色液（有A液和B液的），用前15分鐘配制；
- 標(biāo)準(zhǔn)品：有的試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)配制好的，4度保存，有的是要現(xiàn)配制的，按照說明書操作；
- 濃縮*結(jié)合的二抗和HRP：如果需要配制，試劑盒沒注明配好可以保存多久的話，盡量現(xiàn)配現(xiàn)用（用前15分鐘配制）；
原則是：試劑盒上沒有指出配制物的儲藏方式的話，應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用；不要怕麻煩；還有小瓶的管子開蓋前要離心，以免蓋子上粘連以后總量不夠。室溫溫育的試劑，特別是溫育時間比較短的實驗操作的試劑，加樣對數(shù)據(jù)的影響比較大，特別要注意加樣問題。
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