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閱讀:266發(fā)布時(shí)間:2017-3-22
ELISA試劑盒血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢查。
如有細(xì)菌污染,菌體中也許富含內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)作假陽(yáng)性反應(yīng)。
如在冰箱中保留過(guò)久,其間的可發(fā)作聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不一樣而有所區(qū)別,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。
血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外,別的成份均平等于血清。
制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝結(jié)、收縮后即可獲得。
除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)查驗(yàn)中均以血清作為檢查標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可平等使用。
血清標(biāo)本可按慣例辦法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本也許會(huì)增加非特異性顯色。
ELISA試劑盒在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超越一星期測(cè)定的需低溫冰存。
凍住血清融解后,蛋白質(zhì)有些濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振動(dòng)。
混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢查。自配的緩沖液使用pH計(jì)丈量較正。
重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保留作多次檢查,宜少數(shù)分裝冰存。
保留血清自收集時(shí)就應(yīng)留意無(wú)菌操作,也可加入恰當(dāng)防腐劑。
按試劑盒說(shuō)明書(shū)的請(qǐng)求預(yù)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。
ELISA頂用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。
有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物)。
大多數(shù)ELISA檢查均以血清為標(biāo)本。從冰箱中取出的實(shí)驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。
ELISA試劑盒中本次實(shí)驗(yàn)不需用的有些應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。
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