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多項(xiàng)新技術(shù)助力唾液生物標(biāo)記研究

閱讀:212發(fā)布時(shí)間:2015-8-25

健康成人三個(gè)主要腺體每天大約要分泌11.5升的唾液,這些唾液中大部分是水,其它成分還包括電解質(zhì)和蛋白質(zhì),例如形成粘液,分解食物和細(xì)菌的酶,以及分泌抗體所需的糖蛋白等。

雖然唾液相對(duì)于血液來(lái)說(shuō),更加容易收集,存儲(chǔ)和運(yùn)輸,也更便宜,但是相關(guān)的流體研究和新型唾液,口腔診斷技術(shù)卻并不方便和簡(jiǎn)單。因此設(shè)計(jì)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)需要考慮已商業(yè)化可用的工具,合適的流程,穩(wěn)定性,以及出現(xiàn)問題的策略。

今年的一項(xiàng)肉食性攝入研究表明,微博熏肉的香味能促進(jìn)唾液流量,同時(shí)也不會(huì)干擾激素濃度。

除此之外,還有止咳糖、漱口水和口香糖都可以刺激唾液流量。當(dāng)然首先需要確定這些刺激方法不會(huì)干擾目標(biāo)物的檢測(cè),比如漱口水有可能會(huì)沖淡你的樣品,研究人員說(shuō)。

研究人員說(shuō),“非刺激唾液是通過吐到杯子中,還是通過像我們這樣的刺激工具進(jìn)行收集,也會(huì)影響結(jié)果,"改變唾液量有可能會(huì)改變某些分析物的濃度。

除了刺激唾液量,還有許多因素會(huì)影響唾液的分泌速度,如年齡、運(yùn)動(dòng)、吸煙習(xí)慣、飲酒、時(shí)間和整體口腔健康等,個(gè)人唾液分泌速度也是定量研究*的數(shù)據(jù),一些研究人員會(huì)直接檢測(cè)個(gè)人分泌速度:收集唾液量除以所花的時(shí)間。

唾液中含有多種可以快速降解你目標(biāo)物的酶,一些目標(biāo)分子,如*或褪黑激素在室溫下要比其它成分更為穩(wěn)定,但是一般情況下,還是在樣品收集后立刻放到冰箱中冷藏,同時(shí)在冷凍起來(lái)之前也需要進(jìn)行純化。研究人員說(shuō)。

純化方式一部分取決于你的目標(biāo)分子是在細(xì)胞內(nèi)還是細(xì)胞外,這兩個(gè)存在方式目前也都有試劑盒可用,如細(xì)胞外RNAs,研究人員可以離心細(xì)胞,分析或者冷凍上清液;如果是研究人類DNA,那么就可以采用細(xì)胞裂解,親和綁定基因組DNA,洗脫其它成分。

一些穩(wěn)定Buffers能用于中和降解DNARNA的酶,如果樣品收集后無(wú)法麻煩放回冰箱,那么就可以利用這些試劑盒進(jìn)行保存,如Qiagen RNAprotect Saliva Reagent,還有DNA Genotek的人類DNARNA收集試劑盒等。

蛋白是zui不穩(wěn)定的分析物,許多DNARNA的穩(wěn)定試劑都不能保護(hù)蛋白,為了解決這個(gè)問題,Wong研究組在2012年的一篇文章中提出了一種穩(wěn)定技術(shù),就是預(yù)添加到RNAPro?SAL收集管中。


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