本公司所銷售的猴腫瘤壞死因子αelisa試劑盒 只供科研，保證質(zhì)量，如有任何質(zhì)量問題，本司一律包退包換，咨詢。

猴腫瘤壞死因子αelisa試劑盒測試步驟：

（1）仔細切開覆蓋在孔板上的箔片，從微孔板底部用手指輕輕頂出所用的孔板。注意不要損傷不使用的孔板上的條或孔，而且應將其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存，以防止瓊脂變干；

（2）揭開覆蓋在孔板上的箔片，每孔加入80mL牛奶樣品。并分別加入80mL的陰性和陽性質(zhì)控，加入樣品時應避免交叉污染；

（3）用密封膠將孔板密封，置于65℃恒溫箱或水浴箱中孵育直到陰性質(zhì)控轉化成淺黃綠色（參照每批質(zhì)量檢測報告,大約需要1小時45分鐘）。

注：如果是采用水浴進行孵育的話，請注意避免水進入微孔。樣品孵育時間不能超過質(zhì)檢報告中說明的時間，否則檢測靈敏度會下降。

操作不當將引起較大的誤差，以下敘述各個步驟中的影響因素：

1.加樣，加樣時速度不可太快，避免將標本加在孔壁上部 ，并注意不要濺出或產(chǎn)生氣泡，產(chǎn)生氣泡可以減少標本與包被物的接觸，降低試劑的敏感性。不要讓吸頭接觸孔底部，以防破壞包被物，吸附血清內(nèi)的蛋白，造成假陽性。

2.溫育，溫育過程中，反應板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。

3.洗滌，洗滌是ELISA測定過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。其目的是去除反應體系中與反應無關的成分、未結合的酶結合物以及反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.顯色，顯色是 ELISA中的zui后一步溫育反應，顯色受時間和溫度的影響，一般37℃反應30分鐘可使顯色充分，如果縮短反應時間或者降低反應溫度均可影響檢測的下限。

5.比色，ELISA顯色的結果必須通過酶標儀進行檢測，有兩個重要的原因：一是不同的個體的色覺存在差異，如果僅憑肉眼判斷，則結果重復性差，并且難以形成統(tǒng)一的判斷標準，尤其是對于HBeAb、HBcAb這樣的檢測項目；二是日益頻繁的醫(yī)療糾紛要求臨床實驗室必須對ELISA檢測的原始吸光度值，陰陽性判斷結果等原始數(shù)據(jù)進行保存，否則面對醫(yī)療糾紛時將無法舉證。

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