血管生成素受體Tie-2(Tie-2)Elisa試劑盒說明書

目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)
液體樣本中血管生成素受體Tie-2(Tie-2)的含量。
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血管生成素受體Tie-2(Tie-2)水平。用純化
的人血管生成素受體Tie-2(Tie-2)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依
次加入血管生成素受體Tie-2(Tie-2)，再與HRP 標(biāo)記的血管生成素受體Tie-2(Tie-2)抗體結(jié)合，
形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催
化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管生成素受
體Tie-2(Tie-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)
算樣品中人血管生成素受體Tie-2(Tie-2)含量。

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1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)
準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二
孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，
混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉，再各取50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各
取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混
勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)
品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，
濃度分別為4800 pg/mL，3200 pg/mL ，1600 pg/mL，800 pg/mL，400 pg/mL）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣
品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣
品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混
勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30（48T 的20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T 的20 倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此
重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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絡(luò)塞維,HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品,84954-92-7
28-去甲基-β-香樹脂酮,HPLC≥98%,
大豆蛋白胨培養(yǎng)基價(jià)格,用于發(fā)酵
芒果苷,HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品,4773-96-0
路路通酸,HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品,4481-62-3
異去氧膽酸培養(yǎng)基價(jià)格,BR
野菊花內(nèi)酯,98%以上,
洋川芎內(nèi)酯A,鑒別用,標(biāo)準(zhǔn)品,62006-39-7
燈盞花乙素甲酯,HPLC≥97%,
煌綠乳糖膽鹽肉湯BG培養(yǎng)基價(jià)格,用于大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定
3－乙酰基－11－酮基乳香酸,98%以上,
胡黃連苷 III,HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品,64461-95-6
厭氧菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基價(jià)格,BR
支原體瓊脂培養(yǎng)基價(jià)格,

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