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elisa實(shí)驗(yàn)樣本處理方法

時(shí)間:2015-1-19閱讀:373
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樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

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人殺菌性/通透性增加蛋白elisa步驟說(shuō)明書(shū),人BPIelisa原理
人黑色素細(xì)胞抗體elisa技術(shù),人MC Ab/elisa步驟說(shuō)明
人磷酯酶Celisa技術(shù),人PLC/elisa步驟說(shuō)明
小鼠L選擇素elisa技術(shù),小鼠L-Selectin/CD62L/elisa步驟說(shuō)明
大鼠*12(VB12)elisa試劑盒
人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素elisa步驟說(shuō)明書(shū),人LRelisa原理
人甲狀腺過(guò)氧化物酶elisa步驟說(shuō)明書(shū),人TPOelisa原理
人叉頭框蛋白03(FoxO3)elisa試劑盒
禽腦脊髓炎elisa步驟說(shuō)明書(shū),(AE)elisa原理
豬*elisa技術(shù),豬Cortisol/elisa步驟說(shuō)明
人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子elisa步驟說(shuō)明書(shū),人SLPIelisa原理
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人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉elisa技術(shù),人DPD/elisa步驟說(shuō)明
小鼠胰島素受體β(ISR-β)elisa試劑盒

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