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上海elisa試劑盒公司|廣銳生物

牛細(xì)小病毒(BPV)酶聯(lián)免疫技術(shù)

時(shí)間:2015-5-8閱讀:277
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牛細(xì)小病毒(BPV)酶聯(lián)免疫技術(shù) 廣銳生物-國(guó)內(nèi)高、優(yōu)Elisa試劑盒供應(yīng)商 用于測(cè)定牛血清,血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)小病毒(PV)抗體的表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定標(biāo)本中牛細(xì)小病毒(BPV)。用純化的
牛細(xì)小病毒(BPV)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中細(xì)小病毒(BPV)相結(jié)合,經(jīng)
洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP 標(biāo)記的細(xì)小病毒(BPV)抗體結(jié)合,形成抗體-
抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成
藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),
與CUTOFF 值相比較,從而判定標(biāo)本中牛細(xì)小病毒(BPV)的存在與否。

牛細(xì)小病毒(BPV)酶聯(lián)免疫技術(shù)

密封袋1 個(gè)1 個(gè)
酶標(biāo)包被板1×48 1×96 2-8℃保存
陰性對(duì)照0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
陽(yáng)性對(duì)照0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標(biāo)試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存

牛細(xì)小病毒(BPV)酶聯(lián)免疫技術(shù)

樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20 分鐘,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上
清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離心
20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次
離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程
中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/
分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞
濃度達(dá)到100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分
2
鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br>用。標(biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器
將標(biāo)本勻漿充分。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待
檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上
進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

牛細(xì)小病毒(BPV)酶聯(lián)免疫技術(shù)

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