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卡邁舒(上海)生物科技有限公司
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鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒承接免費(fèi)代檢測(cè)服務(wù),Z大限度節(jié)約經(jīng)費(fèi),我司擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富的銷售、市場(chǎng)和售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),核心市場(chǎng)銷售團(tuán)隊(duì)具有豐厚的行業(yè)經(jīng)驗(yàn),專業(yè)提供各種屬ELISA試劑盒,靈敏度高,重復(fù)性好,科研單位支持貨到付款,上海本地客戶可送貨上門(mén),您的滿意是我們Z大的追求!
鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒
檢測(cè)動(dòng)物種類:
人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚(yú)、斑馬魚(yú)等
檢測(cè)標(biāo)本類型:
血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、唾液、關(guān)節(jié)滑液、肺泡灌洗液等
檢測(cè)指標(biāo):
趨化因子、生長(zhǎng)因子、抑制因子、炎癥因子、營(yíng)養(yǎng)因子、脂肪因子、血管生成因子、動(dòng)脈粥樣硬化因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等
適用于血漿、血清、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚(yú)、斑馬魚(yú)等
可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
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鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒測(cè)定步驟:
測(cè)定時(shí)一般需經(jīng)過(guò)以下步驟:固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個(gè)方面。
1.隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng),因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測(cè)定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測(cè)中,還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不*,對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大,不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4.洗滌是ELISA操作過(guò)程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無(wú)關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過(guò)程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)??捎孟窗鍣C(jī)洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測(cè)讀儀(酶標(biāo)儀),比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng),根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片,以空白孔校零測(cè)定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
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fo?gai?- x?, ;mso-ascii-font-family:"Times New Roman"; mso-hansi-font-family:"Times New Roman"'>溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計(jì)算和結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為陰性
陽(yáng)性判定:樣品OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為陽(yáng)性
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