人胃癌細(xì)胞MKN-45

人胃癌細(xì)胞MKN-45

細(xì)胞接收處理流程：

1：觀察有無(wú)破損漏液情況，如有請(qǐng)拍照及時(shí)聯(lián)系客服。

2：酒精消毒培養(yǎng)瓶表面后顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)，觀察拍照后不用打開培養(yǎng)瓶蓋放入培養(yǎng)箱靜止2-3小時(shí)穩(wěn)定 細(xì)胞狀態(tài)。

3：請(qǐng)按照細(xì)胞操作指南進(jìn)行次傳代凍存處理。

4：產(chǎn)品隨貨會(huì)附帶細(xì)胞說(shuō)明書、細(xì)胞培養(yǎng)操作指南、細(xì)胞鑒定、支原體檢測(cè)報(bào)告。5：若產(chǎn)品有異?；蚱渌蓡枺呻S時(shí)聯(lián)系客服；轉(zhuǎn)至技術(shù)支持

常溫細(xì)胞收貨當(dāng)天處理方式1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。

2. 鏡下觀察有無(wú)微生物污染現(xiàn)象，拍照記錄不同倍數(shù)鏡下細(xì)胞狀態(tài)和有無(wú)染菌現(xiàn)象，方便后續(xù)售后處理。

3.消毒后，更換贈(zèng)送的wan全培養(yǎng)液放置培養(yǎng)箱靜止2-3小時(shí)。如細(xì)胞有多數(shù)懸浮細(xì)胞需要離心收集重新接種止培養(yǎng)瓶。

4. 觀察細(xì)胞密度若超過(guò) 80%則可正常傳代處理(有的原代細(xì)胞不可傳代，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況決定)，shou次傳代推薦比例 1：2 到 1：3（按實(shí)際收貨細(xì)胞密度決定，若不確定可聯(lián)系技術(shù)支持）；若細(xì)胞密度不到 80%則可繼續(xù)培養(yǎng)，注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋；懸浮細(xì)胞注意離心所有培養(yǎng)基以收集細(xì)胞。

5. 由于氣溫，運(yùn)輸?shù)扔绊懺斐少N壁細(xì)胞漂浮的，請(qǐng)將細(xì)胞離心收集后在離心管中消化后進(jìn)行傳代（參考附件），或及時(shí)聯(lián)系技術(shù)支持進(jìn)行指導(dǎo)傳代。

半貼壁半懸浮細(xì)胞處理：

6.該細(xì)胞是半貼壁半懸浮生長(zhǎng),懸浮細(xì)胞可用離心管收集細(xì)胞懸液后，1000rpm 離心5min，離心收集上清

7.當(dāng)細(xì)胞密度在80%以下，將收集T25瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用入5ml wan全培養(yǎng)基重懸，加入回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細(xì)胞生長(zhǎng)80%以上對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代，傳代時(shí)需要將懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞的沉淀用 1-2ml wan全培養(yǎng)基重懸收集到一起，混勻后按1：2比例接種到新的培養(yǎng)瓶。半貼壁半懸浮細(xì)胞傳代：

8.貼壁細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后，在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25 % yi蛋白酶溶液（含EDTA）置于37℃培養(yǎng)箱中消化，待細(xì)胞變圓收縮后可用5mL左右wan全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化，然后輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞；

9.將收集到的懸浮細(xì)胞、pbs清洗液中的細(xì)胞和消化下來(lái)的貼壁細(xì)胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加5-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的wan全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。