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PeproTech重組細(xì)胞因子常見問題解答
PeproTech公司的重組細(xì)胞因子產(chǎn)品經(jīng)過了十分嚴(yán)格的生產(chǎn)、純化及質(zhì)檢過程,保證其在投放市場之前,達(dá)到如下要求:
1. 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實(shí)性。
2. 純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。
3. 生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(in vitro)或體內(nèi)(in vivo)活性檢測。
4. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
5. 內(nèi)毒素:kinetic LAL法檢測內(nèi)毒素。
6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。
產(chǎn)品隨附的說明書上載有產(chǎn)品的各項(xiàng)相關(guān)信息。請仔細(xì)閱讀這些信息,了解其配制和貯存提示。如果在閱讀說明書后仍需更多信息,請查看以下常見問題解答,或致電我們的技術(shù)服務(wù)部門。
重組細(xì)胞因子的凍干狀態(tài)
與市場上已有的其他蛋白產(chǎn)品不同,PeproTech細(xì)胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等),而是以低鹽的形式做凍干處理,因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見的蛋白層。PeproTech的質(zhì)控過程確保每管裝有非常準(zhǔn)確量的蛋白產(chǎn)品。所以我們建議在收到試劑后,務(wù)必于開蓋前先離心20-30秒,使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于管低(此時能否見到白色沉淀均屬正?,F(xiàn)象)。
重組細(xì)胞因子活性單位(units)的換算
各公司在開發(fā)出重組細(xì)胞因子并檢測其活性后,通常會以ED50(半數(shù)有效濃度)或units(活性單位)來標(biāo)識其細(xì)胞因子的生物活性。因此1mg細(xì)胞因子中所含的活性單位(units)可以理解為將1mg/ml細(xì)胞因子原液稀釋成ED50的稀釋倍數(shù),以下是二者的換算公式:
重組細(xì)胞因子的穩(wěn)定性
除非產(chǎn)品說明書上另有特別說明,否則所有PeproTech蛋白產(chǎn)品都為凍干粉形式,在室溫下也能保持很好的穩(wěn)定性。但是,我們推薦凍干產(chǎn)品保存于-20℃。大多數(shù)凍干產(chǎn)品經(jīng)溶解和稀釋后,可短時間保存于4℃;若要進(jìn)行較長時間保存,我們建議稀釋到工作液濃度并加入一定的carrier protein(如0.1% BSA),然后分裝保存于-20℃。請注意每一次凍融過程都會造成蛋白的部分變性,應(yīng)避免反復(fù)凍融。
重組細(xì)胞因子的交叉活性
除了少數(shù)例外,大多數(shù)人類細(xì)胞因子對小鼠細(xì)胞都有活性。許多小鼠細(xì)胞因子對人類細(xì)胞也有活力表現(xiàn),但是與相應(yīng)的人類細(xì)胞因子相比比活力較低。一些人類的細(xì)胞因子如IL-7在小鼠細(xì)胞中甚至表現(xiàn)出比相應(yīng)的小鼠細(xì)胞因子更高的比活力。而干擾素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 是物種特異性的,對于非人類細(xì)胞幾乎沒有活性。相反,成纖維細(xì)胞生長因子 (FGFs) 和神經(jīng)營養(yǎng)因子 (neurotrophins) 是高度保守的,在其它的動物物種細(xì)胞中也能表現(xiàn)很好的活性。
ECV304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株) ATCC 株
PC-12分化(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤) ATCC 株
PA317(鼠胚胎成纖維細(xì)胞) ATCC 株
SP2/0(骨髓瘤細(xì)胞) ATCC 株
CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞) ATCC 株
COS-7(SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞) ATCC 株
VERO(非洲綠猴腎細(xì)胞) ATCC 株
Ana-1(鼠巨噬細(xì)胞) ATCC 株
J-1111(白血病單核細(xì)胞) ATCC 株
J774A1(單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞) ATCC 株
SPA-A1(肺腺癌細(xì)胞) ATCC 株
A673(橫紋肌瘤細(xì)胞) ATCC 株
L-02(正常肝細(xì)胞) ATCC 株
7721(7721肝癌細(xì)胞) ATCC 株
SK-N-SH(神經(jīng)母細(xì)胞瘤) ATCC 株
HL-60(白血病原髓細(xì)胞) ATCC 株
ScaBER(膀胱鱗癌細(xì)胞) ATCC 株
WISH(羊膜細(xì)胞) ATCC 株
H08910(卵巢癌細(xì)胞) ATCC 株
Bcap-37(乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
Hela(宮頸癌細(xì)胞) ATCC 株
PC-3(人前列腺癌細(xì)胞) ATCC 株
SGC7901(胃腺癌細(xì)胞) ATCC 株
786-0(腎透明細(xì)胞腺癌) ATCC 株
6T-CEM(T細(xì)胞白血?。?nbsp; ATCC 株
Jecket(淋巴瘤細(xì)胞) ATCC 株
JAR(胚絨毛癌細(xì)胞) ATCC 株
PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤) ATCC 株
WI-38(人二倍體胚肺細(xì)胞) ATCC 株
THP-1(人單核細(xì)胞) ATCC 株
T-24(膀胱變移細(xì)胞癌) ATCC 株
A375(人類惡性黑色素瘤) ATCC 株
CHRF(人巨核細(xì)胞白血病) ATCC 株
K562(慢性髓原白血?。?nbsp; ATCC 株
RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) ATCC 株
CNE(鼻咽癌細(xì)胞) ATCC 株
RT4(膀胱癌細(xì)胞) ATCC 株
J82(膀胱癌細(xì)胞) ATCC 株
SHG44(膠質(zhì)瘤細(xì)胞) ATCC 株
LoVo(人結(jié)腸癌細(xì)胞) ATCC 株
V79(中國倉鼠肺細(xì)胞) ATCC 株
U937(組織細(xì)胞淋巴瘤) ATCC 株
PT-67(病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞) ATCC 株
HEL(紅白血病細(xì)胞) ATCC 株
293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞) ATCC 株
C6(腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) ATCC 株
SHZ-88(大鼠乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
CBRH-7919(大鼠肝癌細(xì)胞) ATCC 株
NCL-H460(非小細(xì)胞肺癌) ATCC 株
F9(畸胎瘤細(xì)胞) ATCC 株
5637(人膀胱癌細(xì)胞) ATCC 株
A549(人肺腺癌細(xì)胞) ATCC 株
MCF-7(人乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) ATCC 株
HCC1428(人乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
A-704(人腎癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H1755 [H1755](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
SK-HEP-1(人肝癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H838 [H838](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌細(xì)胞) ATCC 株
HPAC(人胰腺癌細(xì)胞) ATCC 株
PC-3(人前列腺癌細(xì)胞) ATCC 株
SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞) ATCC 株
EB-3 [EB3](人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞) ATCC 株
HT-3(人子宮頸癌細(xì)胞) ATCC 株
TT(人骨髓樣甲狀腺癌細(xì)胞) ATCC 株
ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞) ATCC 株
LoVo(人結(jié)腸癌細(xì)胞) ATCC 株
HT-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞) ATCC 株
TE 115.T(人軟組織纖維瘤細(xì)胞) ATCC 株
Cates-1B(人睪丸淋巴胚胎性癌細(xì)胞) ATCC 株
SNU-398(人肝癌細(xì)胞) ATCC 株
Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌細(xì)胞) ATCC 株
SNU-182(人肝癌細(xì)胞) ATCC 株
PLC/PRF/5(人肝癌細(xì)胞) ATCC 株
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤) ATCC 株
PA-1(人卵巢畸胎瘤細(xì)胞) ATCC 株
Hs 578T(人乳腺成纖維細(xì)胞) ATCC 株
Hs 578Bst(人乳腺成纖維細(xì)胞) ATCC 株
TE 354.T(人皮膚基底細(xì)胞癌) ATCC 株
TE 353.Sk(人正常皮膚細(xì)胞) ATCC 株
SW480 [SW-480](人結(jié)腸癌細(xì)胞) ATCC 株
SW620 [SW-620](人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H1299(人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤) ATCC 株
COS-7(非洲青猴腎細(xì)胞) ATCC 株
TOV-112D(人上皮性卵巢癌細(xì)胞) ATCC 株
MRC-5(人正常胚肺成纖維細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H1563 [H1563](人胚肺細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H2170 [H2170](人肺鱗狀細(xì)胞癌) ATCC 株
Hs888Lu(人肺成纖維細(xì)胞) ATCC 株
SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌細(xì)胞) ATCC 株
Hep G2(人肝癌細(xì)胞) ATCC 株
SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞) ATCC 株
C2C12(人肌肉成纖維細(xì)胞瘤) ATCC 株
G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞) ATCC 株
Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞) ATCC 株
BLO-11(小鼠骨骼成纖維細(xì)胞) ATCC 株
NOR-10(小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H596 [H596](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H520 [H520](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H1703 [H1703](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H226 [H226](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
SK-MES-1(人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H1869 [H1869](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌細(xì)胞) ATCC 株
7F2(小鼠雜交瘤細(xì)胞) ATCC 株
3T3-L1(小鼠脂肪細(xì)胞) ATCC 株
THLE-3(人肝上皮細(xì)胞) ATCC 株
PT67(小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞) ATCC 株
hFOB 1.19(人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞) ATCC 株
HIT-T15(倉鼠beta胰島細(xì)胞) ATCC 株
Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta細(xì)胞) ATCC 株
Ca Ski(人小腸頸部表皮樣癌細(xì)胞) ATCC 株
GC-2spd(ts)(小鼠精母細(xì)胞) ATCC 株
NCL-H548(人胰腺癌細(xì)胞) ATCC 株
Hs 683(人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) ATCC 株
Hs 1.Tes(正常人睪丸細(xì)胞) ATCC 株
Hs 181.Tes(正常人睪丸細(xì)胞) ATCC 株
Y567 [VTT C-79094] ATCC 株
[X464-20C] ATCC 株
NCYC 234 [IPAZSC 148] ATCC 株
Y-99 ATCC 株
STJ.EPI.H7 ATCC 株
[CIP 104786] ATCC 株
[CIP 104328; IAM 13570; ICMP 5794; NCPPB 2991] ATCC 株
ICPB TR7 [C-1; ICMP 8639; NCPPB 2626] ATCC 株
R1000 ATCC 株
A4 ATCC 株
MSU-1 ATCC 株
MSU-2 ATCC 株
NRRL 2543 [LSHTM BB325] ATCC 株
R3 ATCC 株
M-37 ATCC 株
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