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小鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)ELISA試劑盒*

時間:2014-9-19閱讀:472
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小鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)ELISA試劑盒是免疫學(xué)中常用檢測方法,加樣時淡黃色的血清能明顯的區(qū)分哪個孔加了哪個孔沒加。但是有一些項目,需要稀釋血清(例如在做乙肝病毒核心抗體時是要稀釋血清30倍),稀釋后淡黃色的血清近乎無色,加樣時非常容易搞錯,很難區(qū)分哪個孔加過哪個孔沒加過。

洗滌板:可以說在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為達到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì),在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。所以在洗板時會有一定誤差,人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機除外),洗的不*或串了孔,對如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。小鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)ELISA試劑盒

5.加抗體標(biāo)本(和二抗):注意該換槍頭時換槍頭.標(biāo)本稀釋一般可用pbs稀釋,也可用封閉液去稀釋.如需加二抗,還要注意二抗的工作濃度,太高浪費,太低則著色淺.

6.顯色:顯色系統(tǒng)又很多,我們一開始做的時候,要選擇適宜的顯色系統(tǒng).注意顯色系統(tǒng)酶活性

底物的保存HRP結(jié)合物加硫柳泵,AP結(jié)合物可加疊氮鈉.

包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時,師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理.還有有的包被原可能不是蛋白,對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被,我把方法簡要的列出如下:①親和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。②脂類物質(zhì):可將其在有機溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干,待酒精揮發(fā)后,讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上小鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)ELISA試劑盒

質(zhì)量控制血清 質(zhì)控血清是已有靶值的血清,在每次的常規(guī)檢驗中加入一份或數(shù)份,通過所得結(jié)果來了解本次檢驗的情況。質(zhì)控血清檢驗的結(jié)果如能控制其誤差在一定范圍內(nèi),就說明該檢驗沒有發(fā)生不允許的誤差。如果出現(xiàn)超過允許誤差范圍的異常結(jié)果,提示該檢驗不合格,應(yīng)尋找原因,糾正后,重檢待測標(biāo)本。因此質(zhì)控血清在質(zhì)控工作中起重要作用。

質(zhì)控血清的使用 衛(wèi)生部臨床檢驗中心制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清,可以在-20℃保持半年定值不變。冰凍狀態(tài)融化使用時,應(yīng)先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜反復(fù)冰融或自行分裝。開展某項檢驗的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清,一般按3-6個月用量準(zhǔn)備。自制的不定值質(zhì)控血清,在一批質(zhì)控血清將用完之前,需準(zhǔn)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清要求性能穩(wěn)定,較長期內(nèi)效價不變,其理化性質(zhì)應(yīng)與病人樣本相近,這樣才能有效地起到監(jiān)測作用。小鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)ELISA試劑盒 

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