羥自由基測(cè)試盒說(shuō)明書(shū) 一、實(shí)驗(yàn)儀器： 
試管、微量移液器、旋渦混勻器、37°C 恒溫水浴鍋，可見(jiàn)分光光度計(jì)（550nm） 
二、適用范圍： 
血清（漿）、各種組織勻漿液、中性白細(xì)胞、某些藥物、部分植物、培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)上清液等。 
三、測(cè)定意義： 
        羥自由基（·OH）是一種氧化能力很強(qiáng)的自由基，其性質(zhì)很活潑，氧化各種有機(jī)物和無(wú)機(jī)物
的速率極快，是造成組織脂質(zhì)過(guò)氧化、核酸斷裂、蛋白質(zhì)和多糖分解的主要因素，與機(jī)體衰老、
腫瘤、輻射孫損傷和細(xì)胞吞噬能力有關(guān)。 
四、操作步驟： 
  標(biāo)準(zhǔn)空白管  標(biāo)準(zhǔn)管  對(duì)照管  測(cè)定管 
蒸餾水（ml）  0.4  0.2  0.2   
0.03％H2O2標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液（ml）    0.2     
底物應(yīng)用液（ml）      0.2  0.2 
樣本*（ml）        0.2 
試劑三應(yīng)用液（ml）  0.4  0.4  0.4  0.4 
混勻，37℃反應(yīng)１分鐘（準(zhǔn)確以秒表計(jì)時(shí)），從加完試劑三開(kāi)始到一分鐘結(jié)束，立即加
入顯色劑終止反應(yīng)，一次只能做一只管子。 
顯色劑（ml）  ２  2  2  ２ 
混勻，室溫放置 20 分鐘后，１cm 光徑， 550nm，蒸餾水調(diào)零，測(cè)各管吸光度值。 
五、計(jì)算公式： 
1、血清計(jì)算公式： 
1
(/ ) (8 824 / )
ml
Uml mmol L
?
=×× ×
?
抑制羥自由基 樣本測(cè)試前 標(biāo)準(zhǔn)品濃度 對(duì)照OD值 測(cè)定OD值
標(biāo)準(zhǔn)OD值 空白OD值 取樣量 能力 稀釋倍數(shù) ．  
2、組織計(jì)算公式: 
(/ ) (8 824 / ) g Umgprot ml mmol L
? ? ?
=×÷ × ? ?
? ? ?
抑制羥自由基 取樣量 標(biāo)準(zhǔn)品濃度 待測(cè)樣本蛋白濃度 對(duì)照OD值 測(cè)定OD值
標(biāo)準(zhǔn)OD值 空白OD值 能力 () ． （ prot/L）
 
3、溶血液計(jì)算公式： 
( )
1
8 824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
標(biāo)準(zhǔn)品濃度 抑制羥自由基 樣本測(cè)試前 對(duì)照 值 測(cè)定 值
． 標(biāo)準(zhǔn) 值 標(biāo)準(zhǔn)空白 值 取樣量 能力 的稀釋倍數(shù) ×  
4、產(chǎn)生羥自由基能力的計(jì)算公式： 
( )
1
8824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
標(biāo)準(zhǔn)品濃度 樣本測(cè)試前 產(chǎn)生羥自由基 測(cè)定 值 對(duì)照 值
． 標(biāo)準(zhǔn) 值 標(biāo)準(zhǔn)空白 值 取樣量 的稀釋倍數(shù) 能力 ×