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作為一個基本物理參量,溫度與細(xì)胞的酶促反應(yīng)、信號傳導(dǎo)等代謝活動密切相關(guān)。準(zhǔn)確探測細(xì)胞內(nèi)的溫度變化,不僅有助于深化對細(xì)胞代謝活動規(guī)律的認(rèn)識,而且也具有潛在的臨床上應(yīng)用價值。細(xì)胞尺度一般在微米量級,傳統(tǒng)的手段難以實現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)溫度的探測。目前,細(xì)胞內(nèi)溫度探測往往借助于納米溫度計——溫敏型納米發(fā)光探針。然而,在進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)溫度探測時,現(xiàn)有納米發(fā)光探針的發(fā)光性質(zhì)除受溫度影響外,往往還受細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜的生化環(huán)境(如:pH、離子強(qiáng)度等)影響。而細(xì)胞內(nèi)的pH、離子強(qiáng)度等生化環(huán)境在時間、空間上是高度動態(tài)的,嚴(yán)重影響了細(xì)胞內(nèi)溫度探測的準(zhǔn)確性和可靠性。
在前期成功構(gòu)建量子點雙光子發(fā)光探針(P-QD)基礎(chǔ)上(Sci. Rep. 5, 9908; DOI:10.1038/srep09908),中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所降雨強(qiáng)課題組與北京大學(xué)教授沙印林課題組繼續(xù)深入合作。研究發(fā)現(xiàn),在近生理溫度 (20-45 oC) 范圍內(nèi),P-QD的發(fā)光強(qiáng)度隨溫度升高成線性下降,并且這種變化規(guī)律不受pH、離子強(qiáng)度的影響?;?/span>P-QD的納米溫度計,檢測靈敏度高達(dá)0.43 oC;在pH 值4到11范圍內(nèi),納米溫度計的發(fā)光強(qiáng)度變化小于2%;當(dāng)溶液的離子強(qiáng)度為500 mM(遠(yuǎn)高于生理條件 ~100 mM)時,納米溫度計的發(fā)光強(qiáng)度變化僅有2%。此外,該類納米溫度計還具有很好的可逆性,溫度在25 oC和37 oC之間交替變化100次,P-QD納米探針的發(fā)光強(qiáng)度變化小于5%。上述這些性質(zhì),結(jié)合其優(yōu)異的生物相容性,使得P-QD可以作為一種理想的細(xì)胞溫度探針?;谠擃愋滦图{米溫度計,實現(xiàn)了單個、活的腫瘤細(xì)胞內(nèi)溫度變化準(zhǔn)確、靈敏探測。
該研究成果已于10月8日在線發(fā)表在Scientific Reports上(Sci. Rep. 5, 14879; doi:10.1038/srep14879)。文章通訊作者為中科院遺傳發(fā)育所研究員降雨強(qiáng)、助理研究員韓榮成及北京大學(xué)教授沙印林。上述研究工作得到了中國科學(xué)院、國家自然科學(xué)基金委等項目的支持。
圖示:a) 不同pH環(huán)境下,P-QD納米探針的實物圖(365nm照射下)及相對發(fā)光亮度對比;b) 不同離子強(qiáng)度下,P-QD納米探針的實物圖(365nm照射下)及相對發(fā)光亮度對比;c) 在25℃與37℃交替變化情況下,P-QD納米探針的發(fā)光強(qiáng)度對比;d) 在細(xì)胞裂解液中,P-QD探測溫度與熱電偶溫度計探測溫度具有很好的一致性。
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