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科學(xué)家采用具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光構(gòu)建高靈敏度的端粒酶活性檢測體系

時間:2015-11-11閱讀:169
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端粒酶是目前一種獲得廣泛應(yīng)用的腫瘤標(biāo)志物,其在腫瘤細(xì)胞中大量表達(dá)且活性明顯增強(qiáng),而在正常組織細(xì)胞中活性極低甚至無活性。這一特點使得端粒酶成為了腫瘤檢測與治療中的新課題。
科學(xué)家采用具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光(Aggregation-Induced Emission)效應(yīng)的熒光物質(zhì),構(gòu)建了一種簡便、快捷、高靈敏度的端粒酶活性檢測體系,為抗癌藥物的篩選與端粒酶在腫瘤診斷方面的應(yīng)用提供了一種新的途徑。
該研究中采用的AIE染料在水溶液中呈高分散狀態(tài),熒光極弱或無熒光;而在聚集狀態(tài)下則將發(fā)出強(qiáng)熒光。端粒酶引物單鏈DNA中的磷酸基團(tuán)帶負(fù)電荷,能夠與帶正電荷的AIE染料以靜電引力相互結(jié)合。端粒酶能夠在其引物DNA 3’-端重復(fù)添加序列TTAGGG使之延長,DNA鏈越長,單根DNA鏈上能夠結(jié)合的AIE染料分子越多,AIE染料分子的聚集程度就越大,體系熒光也就越強(qiáng)。由此可以推斷出端粒酶對其核酸引物的延長能力,從而能夠通過檢測體系的熒光值來方便快捷地判斷端粒酶的活性。研究團(tuán)隊通過檢測不同來源的端粒酶提取物與四十余例膀胱癌病人尿液樣本對這一策略進(jìn)行了驗證。在延續(xù)工作中,該團(tuán)隊創(chuàng)造性地通過在核酸鏈中引入猝滅基團(tuán)達(dá)到了顯著降低熒光背景值的目的,使得干擾物質(zhì)的影響隨之減小。經(jīng)不同來源的端粒酶提取物與近四十例癌癥病人尿液樣本驗證,該策略的檢測特異性與檢出率均獲得顯著提高。

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