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人磷狀癌細(xì)胞抗體ELISA 試劑盒(免費代測)96T/48T 進(jìn)口/國產(chǎn)

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更新時間:2021-12-23 09:17:57瀏覽次數(shù):209次

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人磷狀癌細(xì)胞抗體ELISA 試劑盒(免費代測)96T/48T 進(jìn)口/國產(chǎn)
檢測標(biāo)本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等
檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫夾心法
運輸保存:2~8°保存6個月
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
服務(wù):齊一生物所有的elisa試劑盒均免費代測,全程Elisa實驗技術(shù)指導(dǎo),免費代做實驗

人磷狀癌細(xì)胞抗體ELISA 試劑盒

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人磷狀癌細(xì)胞抗體ELISA 試劑盒

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人磷狀癌細(xì)胞抗體ELISA 試劑盒

本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍:歡迎或或索取原版說明書
zui低檢測限:歡迎或或索取原版說明書

有效期:6個月
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1.         酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2.         標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3.         樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.         標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.         標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.         底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.         濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.     終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 人磷狀癌細(xì)胞抗體ELISA 試劑盒
10、標(biāo)本的采集及保存
1.         血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.         血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.         細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
標(biāo)記抗體的稀釋原則:
臨用前以標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

注意事項
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。  

人磷狀癌細(xì)胞抗體ELISA 試劑盒

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人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)ELISA試劑盒    human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA試劑盒
人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒    human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha,PPARGC1 ELISA試劑盒
人類似cDNA順序BC027382 ELISA試劑盒    human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA試劑盒
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人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒     Human ICE protease-activating factor,IRAP ELISA試劑盒
人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA試劑盒     Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA試劑盒
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人蛋白S(Protein S)ELISA試劑盒    Human Protein S ELISA試劑盒
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人CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒    Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA試劑盒
人CCAAT增強子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒    Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA試劑盒 
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒    Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA試劑盒
人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒    Human lumican,LUM ELISA試劑盒
人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒    Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA試劑盒
人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒    Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA試劑盒
人基質(zhì)裂解素(ST1)ELISA試劑盒     Human Stromelysin-1,ST1 ELISA試劑盒
人基質(zhì)裂解素(ST2)ELISA試劑盒     Human Stromelysin-2,ST2 ELISA試劑盒
人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒     Human Stromelysin-3,ST3 ELISA試劑盒
人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒     Human Lipoxin A4,LXA4 ELISA試劑盒
人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒    Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISA試劑盒
人β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒     Human β-lipotropic hormone,β-LPH ELISA試劑盒
人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒     Human lipoteichoic acids,LTA ELISA試劑盒
人乙胺碘呋酮(AD)ELISA試劑盒     Human amiodarone,AD ELISA試劑盒
人唾液酸(SA)ELISA試劑盒     Human Sialic acid,SA ELISA試劑盒
人鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒     Human sphingomyelin,SM ELISA試劑盒
人尿游離(UFC)ELISA試劑盒     Human urinary free cortisol,UFC ELISA試劑盒
人(CS)ELISA試劑盒     Human chondroitin sulfate,CS ELISA試劑盒
人硫酸皮膚素(DS)ELISA試劑盒     Human dermatan sulfate,DS ELISA試劑盒
人硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒     Human heparan sulfate,HS ELISA試劑盒
人硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒     Human keratan sulfate,KS ELISA試劑盒
人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA試劑盒     Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA試劑盒
人遲現(xiàn)抗原4(VLA4)ELISA試劑盒     Human very late appearing antigen 4,VLA4 ELISA試劑盒
人吖啶橙(AO)ELISA試劑盒    Human Acrine Orange,AO ELISA試劑盒
人甲胺喋呤(MTX)ELISA試劑盒     Human methotrexate,MTX ELISA試劑盒
人對氨基苯甲酸(PABA)ELISA試劑盒     Human para-aminobenzoic acid,PABA ELISA試劑盒
人苯(LPA)ELISA試劑盒     Human L-phenylalanine,LPA ELISA試劑盒
人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒     Human Immune RNA,Irna ELISA試劑盒
人β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒     Human Beta-naphthol,β-Nph ELISA試劑盒
人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒     Human β-Lactamase inhibitors,BLI ELISA試劑盒
人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒     Human α-galactoyl,Gal ELISA試劑盒
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒     Human αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA試劑盒
人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒     Human α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA試劑盒
人腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒     人高香草酸(HVA) ELISA試劑盒
人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒    Human cadherln-related neuronal receptor1,CNR-1 ELISA試劑盒
人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒    Human Ataxia angiectasia mutated,ATM ELISA試劑盒
人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒     Human aryl hydrocarbon receptor,AhR ELISA試劑盒
人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒     Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA試劑盒
人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒     Human maturation promoting factor,MF/MPF ELISA試劑盒

 

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