豬白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒
規(guī)    格：96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細(xì)胞培養(yǎng)上清，組織勻漿等
檢測(cè)方法：ELISA
檢測(cè)類(lèi)型：酶聯(lián)免疫夾心法
產(chǎn)品的用途：僅供科研課題使用齊一生物科技（上海）有限公司提供ELISA試劑盒受到了廣大科研單位*肯定和認(rèn)同。*保證，價(jià)格公道，傾力為國(guó)內(nèi)外科研院校實(shí)驗(yàn)室提供產(chǎn)品。

豬白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：豬白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

豬白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

豬白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

豬白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.
其它產(chǎn)品

NeXtalStock PEG 1,000 (200)    133074    qiagen
NeXtalStock Nickel(II) chloride (200)    133071    qiagen
therascreen EGFR RGQ PCR Kit CE (24)    870111    qiagen
REPLI-g Service,  Single Tube (100 µg)    805923    qiagen
Interlock switch 2, for maintenance    9015356    qiagen
Board, PSB    9015345    qiagen
NeXtalStock DL-Malic Acid (200)    133042    qiagen
NeXtalStock Dimethyl sulfoxide (200)    133037    qiagen
Key, User, red, QIAxcel FA    9018394    qiagen
Tubing, Valve to injection needle (set)    9018337    qiagen
Rotor-Gene Q 6plex (w/o PC) PrioPLUS    9001669    qiagen
Rotor-Gene Q 6plex (w/o PC) Priority    9001668    qiagen
MagAttract DNA Blood Mini M48 Kit (192)    951336    qiagen
Qproteome Nuclear Protein Kit    37582    qiagen
Rotor-Gene Q 5plex System    9001640    qiagen
mericon Salmonella spp Kit (24)    290013    qiagen
QIAGEN PCR Cloning Kit (40)    231124    qiagen
NeXtalStock BICINE pH 9.0 (200)    133149    qiagen
miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control    219610    qiagen
Sensor, photo, EE-SX673A    9015319    qiagen
NeXtalStock Ammonium phosphate (200)    133014    qiagen
Ni-NTA Superflow Cartridge Kit (1ml)    1045800    qiagen
Reagent Pack, DX    950107    qiagen
Fuses 8A, centrifuge board (110V), QIAC    9018319    qiagen
EZ1 Advanced DSP DNA Blood Card    9018305    qiagen
Filter, HEPA, M48    9015285    qiagen
EZ1 Advanced DNA Bacteria Card    9018301    qiagen
Belttool, Y-Drive, Adjust    9018289    qiagen
Manual Sequence Editing    800388    qiagen
Setup    800353    qiagen
BAC End-Sequencing, w/ prep    800347    qiagen
Assy, Power Inlet, Mounting, XY    9239546    qiagen
PhosphoProtein Lysis Buffer (1000ml)    1031358    qiagen
FlexiPlate siRNA 384 Set 0.1 nmol    1027421    qiagen
Lead Screw - Y, PyroQ96ID    9019900    qiagen
Vacuum Pump (220-240 V), PyroQ96VW    9019898    qiagen
Magnet lock, body parts, Qsym    9018169    qiagen
Flash memory, electronic box, Qsym    9018164    qiagen
Cable, extractor, Qsym    9018136    qiagen
Cooling adapter, PCR, Qsym    9018087    qiagen
Tool, gauge, 30 mm, calibration, QIAC    9017842    qiagen
Flexcircuit, pipettor, QIAC    9017823    qiagen
Body, door, QIAC    9017805    qiagen
Cover, Z-drives, QIAC    9017799    qiagen
Tip Guard, M96    9015186    qiagen
Vacuum Manifold Top, SBS    9015094    qiagen
Tubing, retractable tubing, DISU, BR8 RD    9015021    qiagen
Buffer TCL, 2x (8,5/15),G    1031586    qiagen
Buffer MRL (90/125),KG    1027986    qiagen
EZ1 DSP Virus Kit (48)    62724    qiagen
QIAlink, Maintenance / Support Agreement    9243521    qiagen
Connecting plate, BR3000-RapidPlate    9014405    qiagen
BGR Bottle Holder Rotor    9014313    qiagen
Cable, eluate drawer, Qsym    9018152    qiagen
Eluate drawer, Qsym    9018151    qiagen
Heated shaker, Qsym    9018141    qiagen
PCB, control, et/hs, Qsym    9018138    qiagen
Motor, x, extractor, Qsym    9018127    qiagen
Cooling adapter, tubes, 2 ml, Qsym    9018088    qiagen
Cooling adapter, MTP, RB, Qsym    9018085    qiagen
Software Package QIAplex MDD    9018081    qiagen
CD, User Manual QIAcube    9017853    qiagen
EX.UNIT, RCS Incubator Tower (65°)    9017699    qiagen
Z-Module 300 µl, BR8 RD    9015148    qiagen
EX.UNIT, Syringe Pump Plato 3000 (7135)    9015072    qiagen
Shakerplate, autom., BR8 RD    9015064    qiagen