豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒
規(guī)    格：96T/48T
檢測標本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細胞培養(yǎng)上清，組織勻漿等
檢測方法：ELISA
檢測類型：酶聯(lián)免疫夾心法
產(chǎn)品的用途：僅供科研課題使用齊一生物科技（上海）有限公司提供ELISA試劑盒受到了廣大科研單位*肯定和認同。*保證，價格公道，傾力為國內(nèi)外科研院校實驗室提供產(chǎn)品

 豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• 豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• 豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• 豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.

豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒其它產(chǎn)品

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TC-hxbz-460    人眼脈絡黑色素瘤細胞    MuM－2C  
TC-hxbz-461    人眼脈絡黑色素瘤細胞    MuM－2B
TC-hxbz-462    人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞    OCM-1A
TC-hxbz-463    人視網(wǎng)膜母細胞瘤    Y79
TC-hxbz-464    熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細胞    U2OS-Luc teT-on
TC-hxbz-465    人橫紋肌肉瘤細胞    TE671 subline No.2
TC-hxbz-466    人眼脈絡黑色素瘤細胞    C918 
TC-hxbz-467    人橫紋癌細胞    A673  
TC-hxbz-468    人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞    RD
TC-hxbz-469    人表皮癌細胞    A-431
TC-hxbz-470    人正常皮膚細胞     HaCaT
TC-hxbz-471    人皮膚纖維微細胞系    Malmc
TC-hxbz-472    人皮膚成纖維細胞系    BJ
TC-hxbz-473    人成纖維肉瘤細胞    HT1080 
TC-hxbz-474    人皮膚癌細胞系    HS-1
TC-hxbz-475    人皮膚癌細胞系    HS-4
TC-hxbz-476    人胸膜瘤細胞    SMC-1
TC-hxbz-477    人胸腺激酶缺陷性細胞系     143TK
編號    中文    英文名稱
TC-hxbz-478    人舌癌細胞    Tca-8113
TC-hxbz-479    人舌癌細胞系    Tca8113-P60
TC-hxbz-480    人舌癌細胞系    Tca8113-P160
TC-hxbz-481    人舌癌細胞    T6
TC-hxbz-482    人舌鱗癌細胞系    TSCCA
TC-hxbz-483    上頜牙齦癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌    GNM
TC-hxbz-484    人星形膠質(zhì)瘤細胞    U251
TC-hxbz-485    人退行性癌細胞    Calu-6
TC-hxbz-486    人羊膜細胞    HA
TC-hxbz-487    人羊膜細胞    WISH 
TC-hxbz-488    人胚纖維細胞系    HEF
TC-hxbz-489    人皮膚成纖維細胞    CCC-HSF-1
TC-hxbz-490    逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細胞    PA317
TC-hxbz-491    人髓母細胞瘤細胞    D341Med
TC-hxbz-492    人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株    7WCY1.0
TC-hxbz-493    人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株    7WD10
TC-hxbz-494    人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株    7WML6.0
TC-hxbz-495    人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株    7WPS1
TC-hxbz-496    人干細胞因子單克隆抗體細胞株    AMS2
TC-hxbz-497    人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293)    APP-PS1
TC-hxbz-498    人胚胎眼鞏膜成纖維細胞    HFSF
TC-hxbz-499    人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞    HFTF
動物細胞株        
TC-axbz-001    小鼠白血病細胞    M1
TC-axbz-002    小鼠白血病細胞    L1210
TC-axbz-003    小鼠白血病細胞    P388
TC-axbz-004    小鼠單核巨噬細胞白血病細胞    RAW 264.7
TC-axbz-005    大鼠嗜堿性細胞白血病細胞    RBL-2H3
TC-axbz-006    小鼠淋巴樣瘤細胞    P388D1
TC-axbz-007    小鼠白血病克隆細胞系    L6565
TC-axbz-008    小鼠白血病細胞G-CSF依賴性    NFS-60
編號    中文    英文名稱
TC-axbz-009    小鼠肥大細胞癌細胞    P815
TC-axbz-010    小鼠肺癌細胞    Lewis
TC-axbz-011    小鼠肺癌細胞    LLC
TC-axbz-012    小鼠胃癌細胞    MFC
TC-axbz-013    小鼠艾氏腹水癌細胞    EAC
TC-axbz-014    小鼠腹水瘤細胞    SAC-II B2
TC-axbz-015    小鼠腹水瘤細胞    SAC-II C3
TC-axbz-016    小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞    MA-891
TC-axbz-017    小鼠乳腺腫瘤細胞    C127
TC-axbz-018    大鼠乳腺癌細胞    SHZ-88
TC-axbz-019    小鼠骨髓瘤細胞    SP2/0
TC-axbz-020    鼠骨髓瘤細胞    SP2/0-Ag14
TC-axbz-021    小鼠骨髓瘤細胞    P3-X63-Ag8.653
TC-axbz-022    小鼠骨髓瘤細胞    P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]
TC-axbz-023    小鼠骨髓瘤細胞    FO
TC-axbz-024    小鼠淋巴瘤細胞    Yac-1
TC-axbz-025    小鼠淋巴瘤細胞    EL4
TC-axbz-026    小鼠淋巴瘤細胞    EL4.IL-2
TC-axbz-027    小鼠黑色素瘤細胞    B16F1
TC-axbz-028    鼠黑色素瘤細胞系    B16-Fo
TC-axbz-029    小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞    B16F10
TC-axbz-030    小鼠黑色素瘤細胞    B16BL6
TC-axbz-031    小鼠黑色素瘤細胞    B16
TC-axbz-032    小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細胞    SRSV/3T3
TC-axbz-033    小鼠胚胎成纖維細胞    BALB/3T3 clone A31
TC-axbz-034    小鼠肝癌細胞    H22
TC-axbz-035    小鼠肝癌細胞    Hepa 1-6
TC-axbz-036    大鼠肝癌細胞    CBRH-7919
TC-axbz-037    大鼠肝癌細胞    RH-35