鐵蛋白檢測試劑盒（血清）規(guī)    格：96T/48T

檢測標本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細胞培養(yǎng)上清，組織勻漿等

檢測方法：ELISA

檢測類型：酶聯(lián)免疫夾心法

產(chǎn)品的用途：僅供科研究課題使用 

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                 本試劑盒用于測定血清，血漿及相關液體樣本中含量。

實驗原理：

   本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中該產(chǎn)品水平。用純化的本產(chǎn)品抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品抗原，再與HRP標記的本產(chǎn)品抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產(chǎn)品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中該產(chǎn)品濃度。

試劑盒組成：

標本要求： 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟：

• 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1200 ng/L，800 ng/L ，400 ng/L，200ng/L， 100 ng/L）。
• 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
• 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
• 溫育：操作同3。
• 洗滌：操作同5。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
• 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

注意事項：

• 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
• 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
• 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，使用排槍加樣。
• 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
• 底物請避光保存。
• 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
• 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
• 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，    

在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD      

值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋

倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%     

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存；2-8℃。

2．有效期：6個月

其它產(chǎn)品"Adrenomedullin (1- 52),
porcine"        Pllabs
Adrenomedullin (11-50) (rat)        Pllabs
Adrenomedullin (1-50), rat        Pllabs
"Adrenomedullin (16-31)
(human, pig)"        Pllabs
AGRP (87-132), human        Pllabs
"Aldosterone Secretion
Inhibiting Factor (1-35) (bovine)"        Pllabs
Amyloid Bri Protein (1-23)        Pllabs
Amyloid Bri Protein (1-34)        Pllabs
"Amyloid Bri Protein (1-34)
(reduced)"        Pllabs
Amyloid Dan Protein (1-34)        Pllabs
"Amyloid Dan Protein (1-34)
(reduced)"        Pllabs
"Amyloid β/A4 Protein
Precursor770 (740-770)"        Pllabs
Amyloid β-Protein (1-43)        Pllabs
Amyloid β-Protein (42-1)        Pllabs
Anantin (linear sequence)        Pllabs
"Antifreeze Polypeptide (AFP)
(HPLC-6), Winter Flounder"        Pllabs
Apelin-36, human        Pllabs
"Atrial Natriuretic Factor (1-24)
(frog)"        Pllabs
"Atrial Natriuretic Factor (1-29)
(chicken)"        Pllabs
"Atrial Natriuretic Factor (3-28)
(human)"        Pllabs
"Atrial Natriuretic Factor (4-28)
(human)"        Pllabs
"Atrial Natriuretic Peptide (126-
149) (rat)"        Pllabs
"Atrial Natriuretic Peptide (126-
150) (rat)"        Pllabs
"Atrial Natriuretic Peptide (4-24),
frog"        Pllabs
"Atrial Natriuretic Peptide
Substrate, [pS6] ANF 1 – 28"        Pllabs
Bid BH3 - r8        Pllabs
"Big Endothelin -1 (1-39),
porcine"        Pllabs
Biotin - Exendin 4        Pllabs
"Biotin - Gastrin Releasing
Peptide, human"        Pllabs
"Biotin - Glucagon (1 - 29),
bovine, human, porcine"        Pllabs
"Biotin-(Cys1,Lys(biotinyl)18)-
Calcitonin (human)"        Pllabs
"Biotin-(Leu8,D-Trp22,Tyr25)-
Somatostatin-28"        Pllabs
"Biotin-[Tyr0]-Orexin B, mouse,
rat"        Pllabs
"Biotin-a-CGRP (canine, mouse,
rat)"        Pllabs
Biotin-a-CGRP (human)        Pllabs
Biotin-ACTH (1-39), human        Pllabs
"Biotin-Amyloid β-Protein (1-
40)"        Pllabs
"Biotin-Amyloid β-Protein (1-
42)"        Pllabs
"Biotin-Atrial Natriuretic
Peptide (1-28), human,
porcine"        Pllabs
Biotin-Calcitonin (salmon I)        Pllabs
Biotin-CRF (human, rat)        Pllabs
Biotin-Galanin, human        Pllabs
Biotin-Intermedin (human)        Pllabs
Biotin-Intermedin (rat)        Pllabs
Biotin-Neuromedin S (human)        Pllabs
Biotin-Neuromedin S (rat)        Pllabs
"Biotin-Neuropeptide Y (human,
rat)"        Pllabs
"Biotin-PACAP (1-38), amide,
human, ovine, rat"        Pllabs
"Biotin-Pancreatic Polypeptide,
human"        Pllabs
"Biotin-Parathyroid Hormone
(1-34), human"        Pllabs
BNP-32 ,porcine        Pllabs
BNP-45 ,rat        Pllabs
"Brain Derived Basic Fibroblast
Growth Factor (1-24)"        Pllabs