Peprotech品牌貨號:100-15進(jìn)口原裝Human EGF細(xì)胞因子北京現(xiàn)貨
【簡單介紹】
細(xì)胞因子(cytokine)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),具有調(diào)節(jié)固有免疫[1]和適應(yīng)性免疫[2]、血細(xì)胞生成、細(xì)胞生長以及損傷組織修復(fù)等多種功能。
【詳細(xì)說明】
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重組細(xì)胞因子要求:
1. 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品*經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實(shí)性。
2. 純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。
3. 生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(in vitro)或體內(nèi)(in vivo)活性檢測。
4. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
5. 內(nèi)毒素:kinetic LAL法檢測內(nèi)毒素。
6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。
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有不少用戶沒注意說明書上的描述,而是根據(jù)習(xí)慣,直接用PBS或培養(yǎng)液(1640或DMEM等)等溶解細(xì)胞因子或蛋白的凍干粉。這樣做可以嗎?
答:有時可以,要看具體情況。PeproTech的大多數(shù)細(xì)胞因子或蛋白凍干粉的溶解液不是PBS,此時千萬不能用PBS或培養(yǎng)液直接來溶解,具體原因在上面已經(jīng)敘述過。而有部分細(xì)胞因子,如重組人KGF(產(chǎn)品編號:100-19)和重組人FGF-23(產(chǎn)品編號:100-52)等,說明書上的溶解液即為1x PBS,此時用PBS溶解*沒問題,那么用培養(yǎng)液溶解也是可以的,不過還是用先用PBS溶解,然后再用培養(yǎng)液稀釋。
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一定要溶解到的濃度。
蛋白在一定的濃度范圍內(nèi)可以保持良好的穩(wěn)定性,這個范圍就是說明書上所標(biāo)明的濃度范圍,該例為0.1-1.0 mg/ml。這個濃度范圍對于不同的細(xì)胞因子或重組蛋白是不同的。如重組人FGF-6(產(chǎn)品編號:100-30)為0.5-1.0mg/ml,而重組人Activin B(產(chǎn)品編號:120-15)則一定要是0.5mg/ml。
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高于或低于該濃度范圍會有什么問題呢?
答:首先,細(xì)胞因子或蛋白會不穩(wěn)定,即很容易出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。其次,高于這個濃度范圍,可能會超過該蛋白的zui大溶解濃度,即蛋白無法*溶解。再者,高于或低于該濃度范圍,蛋白可能會出現(xiàn)聚集(aggregation),zui終結(jié)果還是部分蛋白未溶解,導(dǎo)致蛋白活性的減弱。一定不能振蕩(vortex)。這里所說的振蕩是指用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩。
有用戶會問,若想保證溶解液與凍干粉充分混勻,以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞因子或重組蛋白的*溶解,該怎么辦呢?
答:多數(shù)細(xì)胞因子或重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的,一般我們用移液槍的槍頭輕吹幾下,即可
100-19 | Human KGF |
100-20 | Human VEGF |
100-20A | Human VEGF 121 |
100-21 | Human TGF-beta1-Mammalian |
100-21C | Human TGF-beta1-Produced in CHO |
100-23 | Human FGF-9 |
100-25 | Human FGF-8 |
100-26 | Human FGF-10 |
100-27 | Human FGF-17 |
100-28 | Human FGF-18 |
100-29 | Human FGF-16 |
100-30 | Human FGF-6 |
100-31 | Human FGF-4 |
100-35 | Human TGF-beta2 |
100-39 | Human HGF |
120-02 | Human BMP-2 |
120-03 | Human BMP-7/OP-1 |
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