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胎牛血清滅活問題:
1、問:加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎? 答:不是必須的,看做什么實驗了。
2、問:四季青胎牛血清滅活是 56℃30 分鐘嗎? 答:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補體受體的細胞,如內(nèi)皮細胞,血清是需要滅活,一般是 56℃,30min。
3、問:我要做滋養(yǎng)細胞培養(yǎng),胎牛血清要滅活嗎? 答:進口的一般都已滅活,國產(chǎn)的不一定,還是滅活一下再用較安全。
4、問:我用病毒上清轉(zhuǎn)染細胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影響轉(zhuǎn)染?我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結(jié)合,影響轉(zhuǎn)染,正確嗎?細胞是單核細胞白血病細胞,病毒是病毒包裝細胞 PT67 收集的病毒上清。為什么要用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時,目的是什么? 答:血清一定要滅活,可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結(jié)合過程的干擾,一般是 2-6 小時,根據(jù)細胞的狀態(tài)決定。血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活!這要根據(jù)實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩 56 度半個小時。
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