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一般來說,選擇性物質(zhì)的存在會縮小它們生長的pH范圍,將培養(yǎng)基的pH調(diào)至預(yù)期的范圍內(nèi)是很重要的。當實驗室根據(jù)培養(yǎng)基成分自己配制培養(yǎng)基時,必須檢測并調(diào)整pH。那么怎樣調(diào)整才是正確且合理的呢?
今天我公司技術(shù)為您講說培養(yǎng)基的pH調(diào)整。測定培養(yǎng)基pH的zui準確的方法是使用pH計,使用前必須用已知pH的(通常pH為4-7)標準緩沖溶液進行校準。將pH計的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養(yǎng)基中,就可以從pH計的刻度讀出培養(yǎng)基的pH。每個生產(chǎn)廠商對每種不同pH計都提供有詳細的操作說明。
配制培養(yǎng)基時,使用帶機械攪拌的pH計可以很容易地調(diào)整pH。培養(yǎng)基位在能夠不停攪拌的容器(如大燒杯)中配制,使用磁力攪拌器,磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養(yǎng)基需在融化后調(diào)整其pH,用可加熱的磁力攪拌器很容易辦到。調(diào)節(jié)pH時用已知pH的標準緩沖液溶液先對pH計進行校準。然后將復(fù)合電極和電阻溫度計(如果有)置于培養(yǎng)基,從燒杯遠離電極的一端緩慢加人適量的鹽酸和氫氧化鈉,保到培養(yǎng)基達到并保持所需的pH。pH計的溫度補償應(yīng)考慮到溫度對電極系統(tǒng)的影響:在一些稀釋液和培養(yǎng)基中,pH隨溫度的變化而有相當大的變化。對于液體培養(yǎng)基和稀釋液而言,通常既可以在25℃下,也可以在其使用時的溫度下調(diào)整和測定。
瓊脂培養(yǎng)基必須在溶解后進行pH的調(diào)整,溶解的溫度在45℃以上。因此,固體培養(yǎng)基應(yīng)在其使用溫度確定pH。這時應(yīng)使用平頭的復(fù)合電極,同時用手動校準pH計的溫度補償。在制備培養(yǎng)基時,若測定出培養(yǎng)基在熔化狀態(tài)和凝固狀態(tài)的pH有所不同時,說明在調(diào)整pH產(chǎn)生誤差。同樣,制備的培養(yǎng)基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌>時,也可能會產(chǎn)生pH的變化。對于脫水培養(yǎng)基,生產(chǎn)廠商己考慮到這一點,通常不謠要再調(diào)整其pH。但應(yīng)認真核對待用培養(yǎng)基的pH。如果脫水的瓊脂培養(yǎng)基在再次溶解或制備的過程中必須調(diào)整pH,那么在滅菌操作步驟之后用過濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進行調(diào)整,以避免造成因再次滅菌而形成的培養(yǎng)基的過度加熱。當用不同的原枓或藥品制備培養(yǎng)基時,必須在高壓滅菌后檢測培養(yǎng)基的pH。此外,如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變化,可在配制培養(yǎng)基時對pH進行適當調(diào)整。但仍需測定培養(yǎng)基滅菌后的zui終pH。
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