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當(dāng)前位置:江蘇綠葉生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA檢測(cè)試驗(yàn)中的復(fù)孔稀釋的重要性
雖說(shuō)ELISA檢測(cè)法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn),但是在實(shí)驗(yàn)中或多或少會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題,復(fù)孔的稀釋也不例外,ELISA檢測(cè)試驗(yàn)中的復(fù)孔稀釋的重要性你知道嗎?
近日,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)朱老師來(lái)電表明了自己的實(shí)驗(yàn)疑惑:“設(shè)計(jì)ELISA復(fù)孔檢查時(shí),是對(duì)同一個(gè)樣品作兩次稀釋,再分別加到板上的兩個(gè)孔,還是只稀釋一次,然后吸取兩次分別加到兩個(gè)孔?前者似乎把稀釋時(shí)的誤差也考慮到了,但做出來(lái)的結(jié)果兩個(gè)孔相關(guān)挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法?
為了減小誤差,是先稀釋再加樣。而針對(duì)這位客戶所遇到的疑問(wèn),我公司技術(shù)人員是這樣解說(shuō)的:
1. 前者測(cè)的是稀釋和移液的誤差,后者只有移液誤差。
2. 一般都是稀釋一次,分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。
3. 由于是從同一原液稀釋,一般不考慮稀釋誤差(稀釋誤差是存在的),都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是一一稀釋,這樣可以使稀釋誤差減?。?。
4. 復(fù)孔是為了排除移液體積,板的影響,以及其他系統(tǒng)誤差的,要求復(fù)孔的濃度是一致的。稀釋后分孔能滿足此要求,一一稀釋不能。
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