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白細(xì)胞介素-2(interleukin-2;IL-2 )

時間:2015-7-27閱讀:126
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其他名稱:T細(xì)胞生長因子(T cell growth factor,TCRF) 

定義:主要由活化的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛生物活性的細(xì)胞因子。是所有T細(xì)胞亞群的生長因子,并可促進活化B細(xì)胞增殖,故為調(diào)控免疫應(yīng)答的重要因子,也參與抗體反應(yīng)、造血和腫瘤監(jiān)視。 

【中文名稱】: 白細(xì)胞介素-2 

【簡寫拼音】: BXBJS-2 

【英文名稱】: Interleukin-2 

【所屬類別】: 免疫增強劑||其他抗腫瘤藥及輔助治療藥 

【別名】 白間素, 欣吉爾, T細(xì)胞生長因子 ,白細(xì)胞介素-2 

【外文名】Interleukin-2 ,IL-2 

【適應(yīng)癥】 白介素-2是一個分子量為14500的糖蛋白,它刺激已被特異性抗原或致絲裂因數(shù)啟動的T細(xì)胞增殖。重組白介素-2可用于臨床研究。主要用于腎癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效(Rossenberg)。LAK細(xì)胞代表1個有單核巨噬細(xì)胞,B和T淋巴細(xì)胞特征的異原的細(xì)胞體。這些LAK細(xì)胞似乎對癌細(xì)胞有特異作用。此外,LAK細(xì)胞(不象T細(xì)胞)介導(dǎo)殺傷不受MHC的約束。[1] 

1 材料和方法:

  1.1 制備粗制IL-2無菌采血,肝素抗凝,用RPMI1640按1∶1將血液稀釋,然后重層于菲可液面上,以1 500r/min離心30min,取白細(xì)胞層,用RPMI1640洗2次,按1~3×10細(xì)胞/ml濃度加入10%胎牛血清RPMI1640,注入一裝有磁棒的大瓶中,置37℃攪拌培養(yǎng)4天,取出,分裝于50ml離心管中,1 500r/min離心20min,棄上清液,將細(xì)胞懸浮于1%胎牛血清RPMI1640培養(yǎng)液中,使細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/ml。同時加入純質(zhì)PHA1~2μg/ml以及多種B淋巴母細(xì)胞株,使其濃度為106細(xì)胞/ml,37℃攪拌培養(yǎng)18~24h后,取出以1500r/min離心30min,取上清,用045μg濾膜過濾除菌,濾液即為粗制IL-2。 

 2 制備精品IL2 

  2.1 硫酸銨沉淀與真空濃縮透析:在4℃下將硫酸銨粉末按50%飽和量加入上述粗制IL-2中,攪拌2h,12000g離心30min,取上清液,再加入80%飽和硫酸銨,4℃過夜,次日以12000g離心30min,棄上清液,將沉淀溶于1% PEG 6 000的1∶2 PBS溶液(pH值73)中,置真空負(fù)壓濃縮*中透析濃縮至所需容量。 

  2.2 Sephadex G100凝膠過濾:用2×180cm的過濾柱及PBS(同上),以80ml/h流速過濾。將各管洗脫液用紫外分光光度計280nm檢測其OD值。同時將幾種不同分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白也用相同條件過濾及檢測其OD值,繪出IL-2及標(biāo)準(zhǔn)蛋白OD值的曲線。將各管洗脫液過濾除菌后,作白細(xì)胞生物活性試驗,按試驗結(jié)果繪出曲線,找出具有zui高IL2活性的幾管洗脫液,混合后,作下一步精制。 

  2.3 BlueSepharose層析:將上述混合后的洗脫液加入BlueSepharose柱中,流速約15ml/h,按每管10ml收集流出液,當(dāng)樣品全部流出柱中以后,用上述PBS洗滌樣品柱,再用梯度NaCl溶液(從0075mol/L至06mol/L NaCl的PBS溶液)洗脫,按2ml/管收集洗脫液。NaCl 溶液梯度及流速均由梯度混合器調(diào)節(jié)控制。洗脫完畢后,作各管OD值及NaCl濃度的測定。各管洗脫液過濾除菌后,作出生物活性測定。將峰值前后的數(shù)管洗脫液混合,即為精制的IL2。置-20℃冰箱保存。 

  3 檢定 

  3.1 活性測定用10%胎牛血清RPMI1640將上述IL2稀釋為50%、25%、125%、625%,而后再將每個百分濃度以及*濃度的IL2倍比稀釋,自1∶2至1∶128,將每個稀釋度分別加入多孔板的孔中,每孔01ml。然后取CT6細(xì)胞株(小鼠的IL2依賴性T細(xì)胞株),調(diào)整濃度為106細(xì)胞/ml,每孔加入01ml,同時用培養(yǎng)基代替IL2作對照。將多孔板培養(yǎng)24h后,取出按每孔1μci的濃度加H3標(biāo)記胸腺嘧啶核苷繼續(xù)培養(yǎng)4h。取出后用MESHⅡ細(xì)胞收集器過濾洗滌細(xì)胞,用β計數(shù)器測定各孔細(xì)胞的cpm。必要時按此結(jié)果繪出曲線,確定活性單位。 

  3.2 蛋白含量測定采用分光光度計,分別測得OD280及OD260,然后按下式計算:蛋白含量(mg/ml)=(144×OD280-075×OD260)×稀釋倍數(shù) 

  3.3 毒性試驗及細(xì)菌檢查參考*制備部分。 

應(yīng)用

【藥理作用】 本品可促進T淋巴細(xì)胞增殖與分化,誘導(dǎo)具有細(xì)胞毒樣活力的殺傷細(xì)胞,誘導(dǎo)及增強殺傷性T細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的活力等。 

【臨床應(yīng)用】 適用于慢性活動性乙型肝炎病毒感染等 

【用法用量】 靜脈滴注:每次2.5萬-5萬U,每日1次。 

【不良反應(yīng)】 常見發(fā)熱、寒戰(zhàn)等反應(yīng)。1.消化系統(tǒng):惡心、嘔吐、腹瀉、結(jié)腸局部壞死或穿孔。 2.呼吸系統(tǒng):可致間質(zhì)性肺水腫、呼吸性堿中毒。3.神經(jīng)系統(tǒng):可發(fā)生行為變化、認(rèn)知障礙。4.心血管系統(tǒng):可出現(xiàn)低血壓、心動過速、心律失常等癥狀。5.血液系統(tǒng):可出現(xiàn)中性粒細(xì)胞上升,淋巴及單核細(xì)胞下降。6.泌尿系統(tǒng):出現(xiàn)少尿、體液潴留、氨質(zhì)血癥??沙霈F(xiàn)內(nèi)分泌功能紊亂,血鈣、血磷下降,*缺乏。 

【規(guī)格】 粉針劑:1000u,10000u, 10萬u, 100萬u. 

注意事項:癲癇、嚴(yán)重低血壓,心、腎功能不全,高熱者禁用。孕婦、患有心臟病或肺部疾病、60歲以上者慎用。用藥期間應(yīng)定期查肝、腎功能。



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產(chǎn)品:

bs-7741R細(xì)胞周期調(diào)控因子10抗體|CDC10
bs-7743R中心體蛋白97kDa抗體|CEP97
bs-7740R卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體|CCDC11
bs-7742R中心體蛋白55kDa抗體|CEP55
bs-8184R富含半*與表皮生長因子樣蛋白2抗體|AVSD2
bs-7745R細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2/腫瘤和微管相關(guān)蛋白抗體|CKAP2
bs-7744R染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)抗體|CHMP4B+CHMP4C
bs-3032R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl (Tyr412)
bs-3041R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl (Tyr226)
bs-3042R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl (Tyr185)
bs-5053R酪蛋白激酶1γ2抗體|CSNK1G2
bs-2389R柯薩奇病毒蛋白受體B抗體|Coxsackie Adenovirus Receptor
bs-5996R腫瘤抑制因子FBW7抗體|CDC4
bs-5997R細(xì)胞粘附分子4抗體|Cell adhesion molecule 4
bs-5995R鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體|CAMTA1
bs-6518R周期素依賴性激酶5激活結(jié)合蛋白C53抗體|CDK5RAP3
bs-6519R著絲粒蛋白H抗體|CENPH
bs-6042R半*蛋白酶抑制劑6抗體|Cystatin E
bs-6024R碳酸酐酶相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體|CA10
bs-2615R白細(xì)胞介素-18受體α鏈抗體|IL-18R alpha/CD218a
bs-3778R轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體|CTCF
bs-3786RT淋巴細(xì)胞CD1抗體|CD1a
bs-4000R磷酸化細(xì)胞周期檢測點激酶2抗體|Phospho-CHK2 (ser19)
bs-2932R網(wǎng)格蛋白重鏈抗體|Clathrin heavy chain
bs-3845R透明質(zhì)酸介導(dǎo)細(xì)胞游走受體抗體|CD168
bs-9804R2號染色體開放閱讀框24抗體|C2orf24
bs-9809R2號染色體開放閱讀框60抗體|C2orf60
bs-5248R磷酸化周期素依賴性激酶7抗體|phospho-CDK7 (Thr170)
bs-5249R磷酸化周期素依賴性激酶9抗體|Phospho-CDK9 (Thr29)
bs-5250R磷酸化細(xì)胞周期檢測點激酶1抗體|phospho-CHEK1 (Ser280)
bs-5251R磷酸化細(xì)胞周期檢測點激酶1抗體|phospho-CHEK1(Ser317)
bs-5253R磷酸化抑癌基因p16抗體|phospho-CDKN2A (Ser140)
bs-5254R磷酸化抑癌基因p16抗體|phospho-CDKN2A (Ser152)
bs-5255R磷酸化抑癌基因p16抗體|phospho-CDKN2A (Ser8)
bs-5256R磷酸化CREB-1抗體|phospho-CREB-1(Ser129)
bs-5252R磷酸化粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β抗體|phospho-CSF2RB (Tyr766)
bs-5263R磷酸化N-鈣粘附分子抗體|phospho-CDH2 (Tyr820)
bs-5268R磷酸化后期促進復(fù)合蛋白3抗體|phospho-CDC27 (Thr244)
bs-5184R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl(Tyr283)
bs-5183R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl(Thr735)
bs-15341R9號染色體開放閱讀框75抗體|C9orf75
bs-0647RCD4抗體|CD4
bs-2347R血小板糖蛋白GPIb抗體|CD42b
bs-4098R蛋白*N甲基4抗體|CARM1
bs-5285R磷酸化蛋白*N甲基4抗體|phospho-CARM1(Ser228)
bs-5286R磷酸化周期素依賴性激酶6抗體|phospho-CDK6 (Tyr13)
bs-4072R磷酸化原癌基因CBL2抗體|phospho-CBL2 (Tyr700)
bs-5148R細(xì)胞分裂周期蛋白7抗體|Cdc7
bs-5242R磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體|Phospho-cdc2 (Ser124)
bs-4094R細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體|Cdc25B
bs-5284R磷酸化CD244抗體|phospho-CD244(Tyr271)
bs-12059R神經(jīng)元電壓門控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體|CACNG3
bs-15170R3號染色體開放閱讀框25抗體|C3orf25
bs-5978R轉(zhuǎn)錄激活因子MYB抗體|c-Myb
bs-2986R陽離子通道精子相關(guān)蛋白1抗體|CATSPER
bs-13802R1號染色體開放閱讀框222抗體|C1orf222
bs-15146R2號染色體開放閱讀框15抗體|C2orf15
bs-6520R細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體|CKAP4
bs-5873R肌肽二肽酶1抗體|CNDP1
bs-6522R酸性線粒體肌酸激酶抗體|CKMT
bs-6516R碳酸酐酶相關(guān)蛋白8抗體|CA8
bs-6517R鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體|CACNB1
bs-6526R原癌基因CD39樣蛋白4抗體|CD39L4
bs-5881R膠原樣蛋白抗體|COL20A1
bs-5959R腫瘤易感性候選基因5抗體|CASC5
bs-6253R鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體|CAMKK2
bs-5930R中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體|Centaurin gamma 1
bs-5963R細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體|CDCA7L
bs-5802R半胱胺酸蛋白酶-2抗體|Caspase 2
bs-15278R7號染色體開放閱讀框63抗體|C7orf63
bs-6239RCD2結(jié)合蛋白3抗體|CD2BP3
bs-5882R膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體|CTHRC1
bs-15115R20號染色體開放閱讀框72抗體|c20orf72
bs-6549R2號染色體開放閱讀框6抗體|C2orf6
bs-5880RCD318抗體|CDCP1
bs-6595R著絲粒蛋白B抗體|CENPB
bs-9791R1號染色體開放閱讀框111抗體|C1ORF111
bs-13799R19號染色體開放閱讀框80抗體|C19orf80
bs-5808R半*雙加氧酶1抗體|CDO1
bs-2924R膠原蛋白11A2抗體|Collagen XI alpha 2
bs-6698RCUL4B蛋白抗體|Cullin 4B
bs-9797R1號染色體開放閱讀框103抗體|C1orf103

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