人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加*40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒
加樣
◎加樣應(yīng)用微量移液器(加樣槍)按規(guī)定的量加入微孔板的1/3處避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
◎每次加樣應(yīng)更換吸嘴,做到一人一吸頭,以免發(fā)生交叉污染;干吸頭預(yù)先在血清中抽吸三次。
◎樣本稀釋,目的是為了減少非特異性反應(yīng),所以一定要先加稀釋液后加樣本,特別注意加樣后要在微量振蕩器上振蕩30秒鐘,同時注意防止液體溢出。如后面操作步驟中加二種以上試劑時均需振蕩混勻。
◎如用滴瓶滴加試劑應(yīng)先將滴瓶搖勻并擠去*滴有氣泡的試劑后加樣。
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒
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