魚(yú)孕激素/孕酮 ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗原包被微孔板，制成固相載體，往包被抗原的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗原、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。
魚(yú)孕激素/孕酮 ELISA試劑盒
酶標(biāo)儀校正程序
◎精密度評(píng)價(jià)：每個(gè)通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同．濃度的甲基橙溶解，蒸溜水調(diào)零，于490nm作雙份平行測(cè)定，每日測(cè)二次（上下午各一次），連續(xù)測(cè)定20天。分別計(jì)算其批內(nèi)精密度，日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。
◎線性測(cè)定：用電子天平精確稱取甲基橙配制5個(gè)系列的溶液，于490nm平行測(cè)8次，取其均值。計(jì)算其回歸方程，相關(guān)系數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差s，并用±1.96s表示樣品測(cè)量的誤差范圍.雙波長(zhǎng)測(cè)定評(píng)價(jià)：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測(cè)定波長(zhǎng)為490nm，校正波長(zhǎng)為585nm），先后于8個(gè)通道檢測(cè)，每個(gè)通道測(cè)3次，51比較各組之間是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以考察雙波長(zhǎng)消除干擾組分的效果。
◎一般酶標(biāo)儀無(wú)585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長(zhǎng)為630nm）
常見(jiàn)酶標(biāo)儀評(píng)價(jià)
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