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P0668Polyphenol oxidase 多酚氧化酶(菌菇)國產(chǎn)

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更新時間:2018-06-06 00:47:15瀏覽次數(shù):307次

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P0668Polyphenol oxidase 多酚氧化酶(菌菇)國產(chǎn)
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P0668    Polyphenol oxidase 多酚氧化酶(菌菇)    國產(chǎn)

過碘酸鹽氧化法:本法只適用于含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的標(biāo)記常用此法。反應(yīng)時,過碘酸鈉將HRP分子表面的多糖氧化為醛基很活潑,可與蛋白質(zhì)上的氨基形成Schiff氏堿而結(jié)合。酶標(biāo)記物按克分子比例聯(lián)結(jié),其*比例為:酶/抗體=1-2/1。此法簡便有效,一般認為是HRPzui可取的標(biāo)記方法,但也有人認為所有試劑較為強烈,各批實驗結(jié)果不易重演。

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ELISA中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡便、有效(結(jié)合率達60%-70%)和重復(fù)性好等優(yōu)點。缺點是交聯(lián)反應(yīng)是隨機的,酶與抗體交聯(lián)時分子間的比例不嚴格,結(jié)合物的大小也不均一,酶與酶,抗體與抗體之間也有可能交聯(lián),影響效果。在兩步法中,先將酶與戊二醛作用,透析除去多余的戊二醛后,再與抗體作用而形成酶標(biāo)抗體。也可先將抗體與戊二醛作用,再與酶聯(lián)結(jié)。兩步法的產(chǎn)物中絕大部分的酶與蛋白質(zhì)是以1:1的比例結(jié)合的,較一步法的酶結(jié)合物更有助于本底的改善以提高敏感度,但其偶聯(lián)的有效率較一步法低。

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