在ELISA實驗檢測過程中，標本質(zhì)量可以說是重要的關(guān)鍵因素，如果實驗標本質(zhì)量不過關(guān)，即使您的實驗操作技術(shù)再膩害也無濟于事。

大家來看看在ELISA實驗中，標本都容易出現(xiàn)的七大問題及解決辦法：          

1．凝血不充分：

此類錯誤主要是抗凝血中存在小凝塊，多發(fā)生在血常規(guī)檢測中，為采血后標本沒有充分顛倒混勻所致；另外，標本量過多，由于抗凝劑的相對不足，血漿中出現(xiàn)微血凝塊的可能性增加，微血凝塊除易阻塞檢測儀器外，由于血液內(nèi)部分成分的消耗而影響檢測結(jié)果，一份只有仔細檢查才能發(fā)現(xiàn)小凝塊的標本，可以使血小板降低30%甚至更多，紅細胞、白細胞計數(shù)也可以降低10%左右，我們規(guī)定，對用于血常規(guī)的標本均輕輕顛倒并仔細觀察，絕大部分可以檢查出。

2．抗凝劑與血液比例不正確：

在凝血功能測定中，常有一些標本量明顯不足，特別是兒童和入院檢查病人標本，由于小孩采血難，入院時需檢查項目多，易發(fā)生抽血量不足，使PT、KPTT和TT假性延長，將誤導(dǎo)臨床診治，因此，血液未到刻度的標本一律退回重抽。

3．標本溶血：

許多指標在紅細胞內(nèi)和血清（血漿）明顯不同，溶血可使LDH、HBDH、血K+、AST 、ALT或等值異常升高，此類錯誤是采血時的一些不良習(xí)慣造成，如：壓脈時間過長，采血不順利、抽血速度太快、血液注入容器時未取下針頭或用力過猛、等均可造成溶血，我們作過實驗，選擇20位體格檢查者，用兩種方法進行比較：⑴用注射器抽血后不去除針頭直接將針頭插入真空采血管，這時在真空管負壓作用下針管內(nèi)的血液被吸入；⑵用注射器抽血后先除去針頭，然后打開真空采血管蓋子緩緩注入標本，兩種采血方法的標本同時作部分生化項目檢測，結(jié)果是：前者比后者LDH上升23.4%－58.2%，平均33.7%；HBDH上升22.5%－61.4%，平均35.4%；AST上升6.7%－31.6%，平均13.7%；ALT上升4.7%－18.2%，平均11.4%；血K+上升23.7%－71.2%，平均36.1%，其它如TP、GGT和UREA等也有或多或少的變化，因此，我們主張用真空采血系統(tǒng)自然流出的標本為宜，如果必須用注射器抽血，抽血后要取下針頭，再緩緩將血液注入標本采集管，對于未用真空采血系統(tǒng)的單位，若注射器和針頭連接不緊，采血時有空氣進入或產(chǎn)生泡沫，使用劣質(zhì)采血器，標本收集管沒有干燥均易造成溶血。

4．采血部位不當：

有些病人需多次檢查，或輸液時間較長，有的護士會在病人輸液更換瓶子時放出一些血液送檢，即使先去除前面的10ml血液，結(jié)果也有明顯變化，如一例輸脂肪乳后直接從輸液的靜脈中采血，導(dǎo)致了許多結(jié)果錯誤，影響前三位的是：TG為12.4mmol/L(平時為1.0 mmol/L左右)，血小板達560×109/L（上升了4倍多），總蛋白濃度從60左右上升到91.6(g/L)，其它常有明顯影響的有血糖、血電解質(zhì)等項目，雖臨床也知道正確的采血方法，但由于護理人員流動性大，工作量超負荷，不時有此類標本送檢，只有反復(fù)與臨床溝通、宣傳，加上對標本審核，對于血細胞比例明顯不對，結(jié)果不合理或有異常變化，及時與臨床聯(lián)系，減少不合格報告發(fā)出。

5．采血量不足：

對于血培養(yǎng)而言,采血過少可降低培養(yǎng)的陽性率，有文獻報告,當培養(yǎng)的血量從2ml增加至20ml時，血培養(yǎng)的陽性率增加30%—50%,培養(yǎng)血量每增加1ml,陽性率增加3%—5%，由于標本已經(jīng)注入培養(yǎng)瓶，不能檢查是否符合要求，只有加強溝通交流，共同努力提高檢驗質(zhì)量。

6．標本采集時間不當：

對細菌培養(yǎng)、激素檢查、找瘧原蟲或絲蟲病原體，需在特定的時間，以提高陽性率。

7．標本運送和處理不及時：

標本的運送雖不屬采集范疇，但標本采集再規(guī)范，若不能及時送檢，將嚴重影響檢驗質(zhì)量，尿常規(guī)標本需在二小時內(nèi)檢測完成，否則細胞等有形成分開始破壞，離體過長的標本作血細胞分析時會影響分類結(jié)果，生化檢測的標本也因為細胞內(nèi)外物質(zhì)交換而變化，我們要求標本及時送檢，到檢驗中心的標本盡快測定，不能及時測定的生化、免疫等標本及時分離血清，加蓋并置4℃冷藏。