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植物蛋白提取試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時(shí),采用特殊的試劑對(duì)植物細(xì)胞釋放出來(lái)的蛋白進(jìn)行沉淀,并使用蛋白酶抑制劑抑制蛋白酶活性,很大程度地保持所抽提蛋白質(zhì)的完整性;而且蛋白抽提物呈干粉狀,有利于蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期保存。
植物蛋白提取試劑盒特點(diǎn):
1、提取的蛋白質(zhì)是包括稀有蛋白在內(nèi)的植物細(xì)胞的全蛋白質(zhì);
2、可以進(jìn)行50×100mg植物組織樣品的提取;
3、經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理后,可以用于2D電泳、等電點(diǎn)聚焦等實(shí)驗(yàn);
4、對(duì)植物細(xì)胞的裂解效果和植物細(xì)胞的非蛋白質(zhì)成分去除效果好;
5、不需要超速度離心,可以同時(shí)處理多個(gè)樣品。
植物蛋白質(zhì)的提取方法基本上有這幾種:鹽析法、有機(jī)溶劑法和等電點(diǎn)法。
1、鹽析法
原理:鹽析法是指在溶液中加入大量的無(wú)機(jī)鹽,可使蛋白溶解度降低沉淀析出。鹽析法主要用于蛋白質(zhì)的分離純化。常作鹽析的無(wú)機(jī)鹽有硫酸鈉、硫酸銨等。
2、有機(jī)溶劑法
原理:機(jī)溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的主要原因是加入有機(jī)溶劑使水溶液的介電常數(shù)降低,因而增加了兩個(gè)相反電荷基團(tuán)之間的吸引力,促進(jìn)了蛋白質(zhì)分子的聚集和沉淀。有機(jī)溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的另一種解釋認(rèn)為與鹽析相似,有機(jī)溶劑與蛋白質(zhì)爭(zhēng)奪水分子,致使蛋白質(zhì)脫除水化膜,而易于聚集形成沉淀。
3、等電點(diǎn)法
原理:在等電點(diǎn)時(shí),蛋白質(zhì)分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負(fù)電荷相等),此時(shí)蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒很容易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀,所以蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí),其溶解度小,容易形成沉淀物。等電點(diǎn)時(shí)的許多物理性質(zhì)如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小,從而有利于懸浮液的過(guò)濾。
植物蛋白提取試劑盒用于植物組織中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑,作用溫和,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),由于含有酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶的研究。
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以上是植物蛋白提取試劑盒的特點(diǎn)與提取方法。
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