1． 內(nèi)源性物質(zhì)
ELISA試劑盒普遍認(rèn)為大概40%的大鼠血清標(biāo)本中富含非特異性攪擾物質(zhì)，能夠不相同程度影響檢查成果。多見的攪擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig （s）抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
（1）類風(fēng)濕因子
血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）能夠與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接，然后致使假陽性。處理該狀況的方法是：①用F（ab）2代替完好的IgG；②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性（63℃，10 min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG參加到標(biāo)本稀釋液中相同有用）；③檢查抗原時，能夠用2-巰基乙醇等參加到標(biāo)本稀釋液中，使RF降解。
（2）補(bǔ)體
ELISA體系中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發(fā)作變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子位點被露出出來，使C1q 能夠?qū)⒍哌B接起來，然后構(gòu)成假陽性。處理的方法是：①用EDTA稀釋標(biāo)本；②用53℃，10 min或56℃，30 min加熱血清使C1q滅活。
（3）嗜異性抗體
血清中富含能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig （s） 的天然嗜異性抗體，可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來，也能構(gòu)成假陽性。處理的方法是：可在標(biāo)本稀釋液中參加過量的動物Ig （s） ，但參加量不足或亞類不相同時無效。
（4）嗜靶抗原的本身抗體
抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的本身抗體，有時能與靶抗原構(gòu)成復(fù)合物，在ELISA方法中均可攪擾抗原抗體測定成果。為防止以上狀況呈現(xiàn)，處理的方法是：測定前需用理化方法將其解離后再測定。
（5）醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig （s） 抗體
臨床開展的用鼠源性CD3等單克隆抗體醫(yī)治，用放射性同位素符號鼠源性抗體的印象確診及靶向醫(yī)治等新技術(shù)，均有也許使這些患者體內(nèi)發(fā)生抗鼠抗體；別的，被鼠等嚙齒類動物咬傷的患者體內(nèi)也能夠發(fā)生抗鼠Ig （s） 抗體。這些患者ELISA測守時均可發(fā)生假陽性。處理的方法是：測定抗原時，在標(biāo)本中參加充足的正常鼠Ig （s） ，然后戰(zhàn)勝因為上述要素構(gòu)成的假陽性。
（6）穿插反響物質(zhì)
類、類AFP樣物質(zhì)等，是與靶抗原有穿插反響的物質(zhì)。在用多抗測定抗原時對測定成果影響不大，但在用單克隆抗體測定抗原時，假如穿插抗原決定簇正好是所用單克隆抗體相對應(yīng)的靶決定簇時，也會呈現(xiàn)假陽性成果。
（7）標(biāo)本中其它成分的影響 血清脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA測定成果有攪擾效果。
2． 外源性物質(zhì)
ELISA試劑盒外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA測定的血標(biāo)本的收集、儲存不妥等要素所形成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中增加物等影響。
（1）標(biāo)本溶血 
因為各種人為要素致使的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA測定中，會致使非特異性顯色，攪擾測定成果。為戰(zhàn)勝上述攪擾效果，標(biāo)本收集時有必要注意防止溶血。
（2）標(biāo)本受細(xì)菌污染 
因菌體中也許富含內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因而，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同，亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測定成果。
（3）標(biāo)本保留不妥
在冰箱中保留過久的標(biāo)本，血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體，在間接法ELISA測定中會致使本底過深、乃至構(gòu)成假陽性；標(biāo)本放置時刻過長（如一天以上），有時抗原或抗體免疫活性削弱，亦可呈現(xiàn)假陰性。為戰(zhàn)勝上述攪擾，ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮收集；如不能當(dāng)即測定，5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)有些濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔，不可激烈振動。
（4）標(biāo)本凝聚不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下，正常血液收集后1/2~2h開端凝結(jié)，18~24h*凝結(jié)。臨床查驗工作中，有時為了爭取時刻迅速檢查，常在血液還未開端凝結(jié)時即強(qiáng)行離心別離血清，此刻的血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測定過程中能夠構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊，易構(gòu)成假陽性成果；這類狀況于次日復(fù)查時因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查成果變?yōu)殛幮?。為防止上述攪擾效果，處理的方法是血液標(biāo)本收集后有必要使其充沛凝結(jié)后再別離血清，或標(biāo)本收集時用帶別離膠的采血管或于采血管中參加恰當(dāng)?shù)拇倌齽?br />（5）標(biāo)本管中增加物質(zhì)的影響
ELISA試劑盒抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如NaN3可抑制ELISA體系中辣根過氧化物酶活性）及迅速別離血清的別離膠等均對ELISA測定有必定攪擾效果。
經(jīng)過以上的剖析和總結(jié)，臨床查驗ELISA測定中呈現(xiàn)假陽性或假陰性等錯誤的成果，掃除大鼠ELISA試劑盒要素和操作要素，再有就是從標(biāo)本要素進(jìn)行剖析，并應(yīng)采納相應(yīng)措施掃除攪擾，然后保證檢查成果的準(zhǔn)確性