ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的運(yùn)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對實(shí)驗(yàn)的檢查作用影響較大，如不留意，有也許致使顯色不全、花板等成果。
將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的因素及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟示，進(jìn)步實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。
下面剖析Elisa實(shí)驗(yàn)操作中也許影響成果的因素，并給出相應(yīng)的解決辦法一、挑選試劑
挑選質(zhì)量的檢查試劑，嚴(yán)厲依照試劑闡明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
也許因素：
1)血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣; 2)手藝操作中，加樣板過多形成加樣后放入孵箱前等候時刻過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺起孔外。
解決辦法：
1) 標(biāo)本為血清：將血液先天然寄存1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管，采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次，放置一段時刻后，3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢查，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時放入孵箱。3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板外表輕拭吸干。 4) 假如選用AT或別的全自動加樣，挑選FAME或別的后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
三、 孵育
也許因素：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸騰，吸附于孔壁，難于清潔*; 2) 孵育時刻人為延伸，致使非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍，難以清潔*。
解決辦法：
1) 貼封片或加蓋; 2) 按闡明步驟嚴(yán)厲控制操作時刻。
四、洗板
也許因素：
1) 選用手藝洗板，孔與孔之間液體穿插。 2) 選用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量缺乏，致使洗板不*;洗板針阻塞，抽吸不*;洗板不暢，致使洗板作用差。 3) 反響板過多形成洗板等候時刻長。
ELISA試劑盒解決辦法：
1) 確保洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干; 2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。