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ELISA試劑盒這些抗體就會與HEV 的多肽抗原聯(lián)絡(luò),并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后參與羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶聯(lián)絡(luò)物,經(jīng)第2次孵育后,ELISA查看試劑盒酶聯(lián)絡(luò)物就會與孵育聯(lián)絡(luò)上的HEV IgM抗體相聯(lián)絡(luò),洗板除去未聯(lián)絡(luò)的酶聯(lián)絡(luò)物,參與TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只需那些富含HEV IgM抗體和酶聯(lián)絡(luò)物所構(gòu)成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色改動,參與硫酸溶液停止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,基本原理ELISA查看試劑盒方法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價聯(lián)絡(luò),此種聯(lián)絡(luò)不會改動抗體的免疫學(xué)特性,也不影響酶。
此種酶符號抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性聯(lián)絡(luò)。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型成為有色的氧化型,ELISA查看試劑盒出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因而,可通過底物的顏色反應(yīng)來斷定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng),顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。
ELISA試劑盒此種顯色反應(yīng)可通過ELISA查看試劑盒儀進行定量測定,這樣就將酶化學(xué)反應(yīng)的靈敏性和抗原抗體反應(yīng)的特異性聯(lián)絡(luò)起來,使ELISA方法成為一種既特異又靈敏的查看方法。
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