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什么是定性?什么是定量?
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這些問題是不少實驗新手在購買elisa試劑盒時會咨詢到的問題。由于客戶們在訂購產(chǎn)品的時候咨詢到的是我司業(yè)務(wù)員,對于一些產(chǎn)品訂購流程,基本信息(如規(guī)格)等問題,業(yè)務(wù)員們會跟您細(xì)細(xì)的解說,涉及到技術(shù)問題時業(yè)務(wù)員會幫您安排技術(shù)指導(dǎo)。
什么是定性?什么是定量?
定性是指判定物質(zhì)有無的屬性;
定量是指判定物質(zhì)的用量,定量的前提是定性,目前生化試劑大都為定量檢測。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是具有一種或幾種物理或化學(xué)性質(zhì)已經(jīng)充分確定,并用于校正儀器、評價一種測量方法的物質(zhì);而校準(zhǔn)物是一種用于校準(zhǔn)、分度或修正測量值的物質(zhì)或裝置,這種物質(zhì)和裝置必須跟蹤國家或的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或裝置;校準(zhǔn)物是公司用來校準(zhǔn)某檢測系統(tǒng)(儀器+試劑+方法)的;質(zhì)控品與校準(zhǔn)品的區(qū)別:組成成份不一樣;溯源的要求不一樣;用途不一樣。
將樣品加入孔中并孵育,假如其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長:450nm處丈量O.D.值,按照測試尺度,O.D.值大于或即是Cut-Off值的樣品被以為是初試陽性。應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段。
包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要。就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。
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