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血清提取蛋白的制作方法:
1、取經(jīng)過穩(wěn)定的血液,作離心分離15~30分鐘,每分鐘轉(zhuǎn)速為2500~3000轉(zhuǎn),從而取得固形物,去除血漿,用水使固形物沉渣溶解。
2、置血紅素于培養(yǎng)基中,為了使培養(yǎng)基酸化而使血紅素分子中的二價鐵血紅素和血球蛋白的結(jié)合體分離,預先制備好醋酸和氯化鈉的混合物并將它加熱到90~110℃。
3、混合時將固形物的溶血產(chǎn)物緩慢地添加到加熱的混合物中,重新把溫度逐漸地升高到沸點,煮沸5~15分鐘,以便使結(jié)合體*分離,接著將混合物逐步冷卻到室溫。
4、為了使二價鐵血紅素溶解并消除,在混合物中按溶物產(chǎn)物比值2∶1~5∶1添加*醚,這時提取出來的蛋白質(zhì)呈白棉絮狀,將溶液過濾,再用*醚清洗。
5、100毫升血中提取的蛋白質(zhì)產(chǎn)品相當于14.4克,應用這種方法,每100毫升的血液可提高蛋白質(zhì)得率45%。
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