糖化酶測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意 :正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
糖化酶,即葡萄糖淀-粉酶(EC3.2.1.3),又稱γ-淀-粉酶,是一種外切型糖苷酶,它從淀粉的非還原性末端水解α-1,4糖苷鍵和α-1,6糖苷鍵,將淀粉*水解為葡萄糖,因此廣泛的應(yīng)用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有機酸,甘油,淀粉糖等工業(yè)中,是我國重要的工業(yè)酶制劑之一。
測定原理:
糖化酶水解可溶性淀粉生成葡萄糖,與3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色化合物,在540nm處有大光吸收,在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與葡萄糖的量成正比,可測定計算得糖化酶的活力。
糖化酶測試盒_糖代謝系列
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。
酶液提取:
1.組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
2.細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
3.培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。