土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)測試盒_土壤系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等動物和某些細菌以及植物根中,催化谷-氨酰胺水解成谷-氨酸和氨,在氮素代謝中具有重要調(diào)控作用,尤其是調(diào)節(jié)游離氨含量和尿素代謝。
土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)測試盒_土壤系列
測定原理:
S-GLS催化谷-氨酰胺水解成L-谷-氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。
需自備儀器和用品:
臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽、甲苯、冰和雙蒸水。
試劑組成和配制:
試劑一×1瓶,8 mL,4 ℃保存;
試劑二×1瓶,20 mL,4 ℃保存;
試劑三×1瓶,30 mL,常溫保存;
試劑四×1瓶,10 mL,常溫保存;
試劑五×1瓶,6 mL,常溫保存;
試劑六×1瓶,6 mL,常溫避光保存。
酶活性計算:
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 3.8488x +0.0057;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/mL),y為吸光值A(chǔ)。
單位定義:每g土樣每min催化谷-氨酰胺生成1nmol 氨定義為一個酶活力單位。
S-GLS(nmol/min/g 土樣)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反總÷W÷T×1000
=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V反總:反應(yīng)體系總體積:1.05mL;T:反應(yīng)時間,2h=120min;W:樣本質(zhì)量,g; 1000,μmol到nmol換算系數(shù)。