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上海紀寧實業(yè)有限公司

當前位置:上海紀寧實業(yè)有限公司>>生化測試盒>>光合作用系列>> 25管/24樣二磷酸核酮糖羧化酶Rubisco測試盒_光合作用

二磷酸核酮糖羧化酶Rubisco測試盒_光合作用

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號25管/24樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時間:2022-08-01 14:26:03瀏覽次數(shù):862次

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品牌 紀寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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二磷酸核酮糖羧化酶Rubisco測試盒_光合作用

測定方法:分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:25管/24樣

注   意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

二磷酸核酮糖羧化酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一個關(guān)鍵酶,既控制著CO2的固定,同時又制約著碳素向Calvin循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流,其活性的大小直接影響著光合速率。

二磷酸核酮糖羧化酶Rubisco測試盒_光合作用

測定原理:

在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)與1分子的CO2結(jié)合,產(chǎn)生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA),PGA可通過外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的作用,產(chǎn)生甘油醛-3-磷酸,并使還原型輔酶I(NADH)氧化。因此,340nm吸光度的變化可計算還原型輔酶I氧化速率,還原型輔酶I氧化速率可反應(yīng)Rubisco的活性。

需自備的儀器和用品:

可見-紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體25mL×1瓶,4℃保存。

提取液二:液體25mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:30mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入12.5mL試劑一,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入12.5mL試劑一,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

試劑四:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入1.25 mL試劑一,充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

(注意:試劑二、三、四溶解后,按需分裝-20℃保存。)

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粗酶液制備:

①總Rubisco酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。

②胞漿和葉綠體Rubisco酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿Rubisco酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中Rubisco酶活性。

建議測定總Rubisco酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的Rubisco,則按照步驟②提取粗酶液。

(注意:粗酶液制備過程中超聲破碎操作使用細胞破碎儀進行。)

植物葉綠素chlorophyll含量測試盒_光合作用

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類胡蘿卜素carotenoid含量測試盒_光合作用

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二磷酸核酮糖羧化酶Rubisco測試盒_光合作用

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