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Roche、Sigma、GIBCO、Amresco、Fluka、Merck、Invitrogen、Difco、Serva、Whatman等試劑品牌,大家都在用,T4 DN連接酶價(jià)格也不貴,規(guī)格、包裝多樣。
中文名稱: T4 DN連接酶 1000u sigm分裝
英文名稱: T4 DN Ligse
產(chǎn)品規(guī)格: BR,5u/ul
包裝: 200U/1000U
產(chǎn)品規(guī)格: BR,30u/ul
包裝: HC5000U
CS號:9015-85-4
分子量:55.3kD,單體
T4 DN連接酶級別:BR
分子量:55.3kD,單體
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:1u/ul(200CEU/ul)
濃度:5Weiss u/ul(1000CEU/ul)
濃度:30Weiss u/ul(6000CEU/ul)
活性定義:是指在TP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM TP, 25ug/ml BS, 12uM(300ug/ml)的5-DN末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lmbd DN 產(chǎn)物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM TP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDT和50%(v/v)甘油
10×T4 DN Ligse緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM TP(PH7.5,25℃)
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NC1或KC1的濃度超過200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DN Ligse活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DN Ligse與DN結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Ferments公司6×DN Loding Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時(shí),連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DN Ligse,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DN的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DN或RN中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DN、RN或DN/RN復(fù)合體中的單鏈切口,連接DN的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子TP
用途:生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DN的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DN連接;雙鏈DN、RN或DN-RN復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RN檢測;位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長度多態(tài)性
保存: -20°C
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一般T4 DN連接酶說明書應(yīng)該體現(xiàn)CAS號、產(chǎn)品純度、產(chǎn)品外觀、英文名稱、中文別名、分子式、分子量等產(chǎn)品信息,想要電子版試劑產(chǎn)品說明書,可免費(fèi)向我們索取。
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