氧化與抗氧化系列_銅藍(lán)蛋白(Cp)含量測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白,有運(yùn)輸銅的功能,同時(shí)具有氧化酶的活性,是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑。
氧化與抗氧化系列_銅藍(lán)蛋白(Cp)含量測(cè)試盒
測(cè)定原理:
銅藍(lán)蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物,在645nm處有特征吸收峰,依此可得銅藍(lán)蛋白活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體7mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。(使用前37℃預(yù)熱)
樣本前處理:
1、血清(漿)等液體樣本:直接檢測(cè)。
2、動(dòng)植物組織樣本:稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水,進(jìn)行冰浴勻漿。10000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定操作表:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至645nm,蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
空白管測(cè)定管
樣品(µL)3030
試劑一(µL)9090
試劑二(µL)60
混勻,37℃預(yù)熱5min
試劑三(µL)120120
混勻,37℃反應(yīng)30min
試劑二(µL)60
混勻,25℃室溫放置5min,取200µL于微量石英比色皿/96孔板中,測(cè)定645nm處吸光值。
ΔA=A測(cè)定-A空白。