氧化與抗氧化系列_蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意 ：正式實(shí)驗(yàn)之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
蛋白質(zhì)羰基是多種氨基酸在蛋白質(zhì)的氧化修飾過(guò)程中的早期標(biāo)志，其含量高低表明蛋白質(zhì)氧化損傷程度的大小，是衡量蛋白質(zhì)氧化損傷的主要指標(biāo)。
氧化與抗氧化系列_蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒
測(cè)定原理：
羰基與2--肼反應(yīng)生成紅色2--腙，在370nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、漩渦震蕩儀、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水、無(wú)水乙醇、乙酸乙酯。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根據(jù)樣品數(shù)，每支加1mL水溶解，每支為10個(gè)樣品用量）
試劑二：液體6mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：根據(jù)測(cè)定樣品量，將乙酸乙酯和無(wú)水乙醇等體積混合。
試劑六：液體60mL×1瓶，4℃保存。
樣品處理：
1.組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，于4℃，4000g離心10min，取上清，加入0.1mL試劑一，室溫放置10min，4℃，10000g離心10min，取上清待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3.血清等液體樣本：直接測(cè)定。
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