多功能氧化酶(MFO)測試盒_氧化與抗氧化系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出;還可產(chǎn)生激活反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì),導(dǎo)致毒性增強,成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究,對于從分子生物學(xué)水平上進一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義。
多功能氧化酶(MFO)測試盒_氧化與抗氧化系列
測定原理:
MFO催化對硝基苯甲醚,在400nm下有特征吸光值。
自備用品:
分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、氯仿。
試
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃避光保存;
試劑二:粉劑×3管,-20℃保存;臨用前取一管加入2mL水溶解,現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑三:液體30mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體80mL×1瓶,4℃保存。
FO活性計算:
測定步驟:
1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至400nm,蒸餾水調(diào)零。
2、在10mL管中依次加入如下試劑
試劑名稱(μL)測定空白
試劑一500500
試劑二100100
提取液400900
樣本500
混勻,37℃水浴30min
試劑三500500
分別加入2.5mL氯仿,充分混勻萃取,靜置10min,取下層氯仿層1.5mL至新的管中。再加入試劑四1.5mL,充分混勻萃取,取上層水相1mL于1mL玻璃比色皿中,400nm下測定吸光值A(chǔ)測定與A空白,△A=A測定-A空白??瞻坠苤恍铚y一管。