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ELISA試劑盒的反應中抗原過剩

閱讀:351發(fā)布時間:2016-10-18

  ELISA試劑盒標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。ELISA試劑盒這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應,因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時,反應甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增髙的物質(zhì)時,應注意可測范圍的zui高值。用髙親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。
  ELISA試劑盒雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,伹不適用于測定半抗原及小分子單價抗,因其不能形成兩位點夾心。

注:標本必須為液體,不含沉淀。

保存方法:
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。 3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。


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