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技術(shù)文章

ELISA實驗通用規(guī)則十八條

閱讀：158發(fā)布時間：2016-11-24

1）ELISA試劑盒要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。
2）要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3）要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4）實驗時，要使底物避光保存。
5）用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6）吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
7）將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
8）液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
9）ELISA試劑盒溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
10）洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
11）洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
12）底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
13）檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14）底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
15）待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。
16）溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
17）應(yīng)盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。
18）ELISA試劑盒對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。


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