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技術(shù)文章

ELISA試劑盒抗原修復(fù)方法

閱讀:254發(fā)布時間:2017-1-3

ELISA試劑盒以HRP符號的鏈霉親和素復(fù)合物(HRP Streptavidin Conjugate,HRP-SA)為根底,可用于檢查細(xì)胞、安排內(nèi)的特異性IL-10抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位、布景清晰。在所用的IL-10一抗與相應(yīng)靶抗原后,用生物化二抗與一抗特異性,zui終參加HRP-SA,構(gòu)成抗原—特異一抗—*化二抗—HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。
抗原修正辦法
常用抗原修正液:檸檬酸緩沖液(0.01M pH6.0)、EDTA抗原修正液(pH8.0或9.0)等等。
一、ELISA試劑盒酶消化修正法
切片脫蠟水化處理,TBS沖刷,在安排上滴加*或*,37℃孵育20~30min后TBS沖刷即可。
二、微波抗原修正法
微波盒中參加抗原修正液微波加熱至歡騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已歡騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來水沖刷,取出切片。因不一樣微波爐微波處理時刻存在區(qū)別,須自行調(diào)整。
三、直接高壓抗原修正法
取修正液于不銹鋼高壓鍋中加熱至歡騰,將安排切片置于耐高溫切片架上,修正液歡騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源,天然冷卻至室溫后自來水沖刷,取出切片。此辦法適用于較難檢查或核抗原的修正。
四、隔水式高壓抗原修正法
ELISA試劑盒不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至歡騰,微波盒中參加修正液于微波爐中加熱至歡騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計時4~8 min即可封閉熱源,天然冷卻至室溫后自來水沖刷,取出切片。此辦法適用于較難檢查或核抗原的修正。

 


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