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ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋

閱讀：175發(fā)布時(shí)間：2015-3-16

     如果加樣不準(zhǔn)就會(huì)造成誤差，尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時(shí)，很小的誤差，會(huì)導(dǎo)致較大的相對(duì)誤差，使陰性(或弱陽(yáng)性)標(biāo)本呈陽(yáng)性(或陰性)。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA檢測(cè)試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。目前，大部分血站都已使用全自動(dòng)酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本，可較好地避免以上誤差。

 1、2包被物的純度。在酶聯(lián)免疫測(cè)定尤其是間接ELISA中，ELISA檢測(cè)試劑盒的特異性取決于使用抗原的純度。目前由于技術(shù)條件的限制，包被用抗原或抗體的純度不可能達(dá)到*，所以有些非特異性顯色不可避免，只能盡可能提高純度，提高特異性。目前使用的包被抗原一般為合成多肽抗原。 
1、3包被抗體的效價(jià)。具有高親和力和高特異性的包被抗體，是決定試劑特異性的重要方面。 
1、4 封閉。是ELISA檢測(cè)試劑盒中重要的一步，目的是封閉固相載體表面尚未被所占據(jù)的空隙[2]，減少后續(xù)步驟中非特異性蛋白的干擾。 
    檢驗(yàn)標(biāo)本中含有酶標(biāo)記物的干擾物 
1內(nèi)源性干擾物：類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等，類風(fēng)濕因子是可作用于多種動(dòng)物以及人IgGFc段的自身抗體，多數(shù)為IgM類，ELISA檢測(cè)試劑盒能充當(dāng)抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反應(yīng)，從而呈現(xiàn)非特異性顯色。 
黃疸血標(biāo)本中常含有內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，如用辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記物，就有可能產(chǎn)生非特異性顯色。 


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