在實(shí)際工作當(dāng)中有很多要素影響著免疫組化的成果，包括技能人員是不是嫻熟掌握悉數(shù)試驗(yàn)的操作程序、抗體的特異性、辦法的靈敏性、標(biāo)本的固定、安排的處理、是不是進(jìn)行抗原批改、批改液的PH值等等要素。為了讓每個(gè)試驗(yàn)室能夠繼續(xù)穩(wěn)定地完成牢靠的試驗(yàn)染色成果，應(yīng)當(dāng)將免疫組化染色技能中的悉數(shù)流程納入標(biāo)準(zhǔn)化。雖然免疫組化在很多試驗(yàn)室中已慣例開(kāi)展，但它是一個(gè)多過(guò)程、多要素決定的一種試驗(yàn)辦法，由于各試驗(yàn)室選用的批改辦法、染色辦法、試劑廠家、抗體克隆號(hào)、檢查體系等有所不一樣，染色成果會(huì)呈現(xiàn)較大差異，適當(dāng)部分的試驗(yàn)室對(duì)免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化的知道尚欠足夠注重, 致使不良的染色成果對(duì)病理確診致使誤導(dǎo)，因而免疫組化染色成果的牢靠性受到了*的重視。
一、 免疫組化成功的要素
病理科醫(yī)師要有適當(dāng)?shù)拿庖呓M化確診常識(shí)和免疫組化技能經(jīng)驗(yàn)，要明白知道免疫組化技能是一門(mén)試驗(yàn)性、技能性十分強(qiáng)的技能，要多了解多種抗體在安排中的表達(dá)情況，以及影響免疫組化成果的各種要素，只要進(jìn)步醫(yī)師的免疫組化確診水平才干防止過(guò)錯(cuò)的判別，才干確保免疫組化確診的準(zhǔn)確性。病理技能人員是免疫組化試驗(yàn)成功的關(guān)鍵要素，操作人員要有豐厚的免疫組化的理論常識(shí)及嫻熟的免疫組化染色技能，十分明白每一個(gè)過(guò)程的使用原理，使試驗(yàn)成果更具牢靠性。牢靠的試驗(yàn)試劑和試驗(yàn)辦法是每個(gè)試驗(yàn)室的*條件。由于試驗(yàn)辦法多種多樣，抗體的品種繁多，每個(gè)試驗(yàn)室都應(yīng)當(dāng)確保高質(zhì)量?jī)r(jià)的試劑，并摸索出的試驗(yàn)條件。優(yōu)異的免疫組化取決于有用的抗原批改、靈敏的檢查體系、適宜的試驗(yàn)質(zhì)控對(duì)照及嫻熟和有責(zé)任心的技能人員。
二、免疫組化染色前處理技能操作標(biāo)準(zhǔn)
1．選材：抱負(fù)的選材厚度是0.2cm～0.3cm，大多數(shù)試驗(yàn)室都以為安排在加熱抗原批改過(guò)程中構(gòu)成脫片的首要原因是選材過(guò)厚或脫水浸蠟處理不當(dāng)所構(gòu)成的。杰出的選材、固定、脫水過(guò)程是免疫組化質(zhì)控的條件，假如H&E切片都做不出滿(mǎn)足的染色成果，那么免疫組化染色也將無(wú)從談起，底子無(wú)法確保染色質(zhì)量。
2．固定：在很多的安排固定液中（如甲醛、乙醇、戊二醛、多聚甲醛 等），不一樣的試驗(yàn)辦法在使用上各有千秋。但在堅(jiān)持安排細(xì)胞構(gòu)造的完整性、抗原可測(cè)定性、安排滲透性以及試劑的報(bào)價(jià)上，福爾馬林是、既經(jīng)濟(jì)又通用。而含酸或含汞的固定液對(duì)抗原保留均不抱負(fù)。安排離體后固定通常不要超過(guò)30分鐘，在常溫條件下固定時(shí)間為8-24小時(shí)。一起還要留意防止福爾馬林過(guò)度固定構(gòu)成的安排抗原丟掉，有研究發(fā)現(xiàn)新鮮安排經(jīng)過(guò)福爾馬林一周固定后安排抗原丟掉嚴(yán)峻，抗原簡(jiǎn)直不能被檢查，由于安排固定后會(huì)致使蛋白或蛋白分子之間構(gòu)成交聯(lián)，致使抗原位點(diǎn)隱瞞，能夠經(jīng)過(guò)抗原批改辦法來(lái)批改，若加抗體前不選用抗原批改，則免疫組化染色常不能到達(dá)抱負(fù)成果或不成功。安排同樣不能*放置在70%的乙醇中，酒精固定后的安排形狀不如福爾馬林固定的安排。脫鈣液對(duì)抗原損壞較為嚴(yán)峻，因而在安排脫鈣前在福爾馬林液中固定48小時(shí)，若安排沒(méi)有固定透則酸會(huì)損壞抗原，脫鈣液中酸的濃度與脫鈣時(shí)間都必須盡量控制在zui低的限度。
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