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EISA試劑盒試驗(yàn)必須遵循的三個(gè)核心原理

閱讀:130發(fā)布時(shí)間:2017-1-18

EISA試劑盒試驗(yàn)有必要遵循以下3個(gè)中心原理:
(1)抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性;
在實(shí)際操作中,除了選擇試劑外,有必要嚴(yán)峻按照操作過程進(jìn)行操作,一同作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以慎重的工作作風(fēng)查看每一份標(biāo)本,才華確保查看質(zhì)量。
如今國內(nèi)已有恰當(dāng)數(shù)量的單位具有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這關(guān)于完結(jié)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化查看、前進(jìn)查看質(zhì)量起到了重要效果。
ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的運(yùn)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的查看效果影響較大,如不留意,有可能致使顯色不全、花板等結(jié)果。
(2)抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶銜接構(gòu)成酶聯(lián)絡(luò)物,而此種酶聯(lián)絡(luò)物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
將血液先天然寄存1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后有必要當(dāng)即倒置*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)查看,可放在2-8℃冰箱中,若要儲存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
加樣后及時(shí)放入孵箱。
EISA試劑盒加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
假設(shè)選用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
(3)酶聯(lián)絡(luò)物與相應(yīng)抗原或抗體聯(lián)絡(luò)后,可根據(jù)參與底物的顏色反應(yīng)來斷定是不是有免疫反應(yīng)的存在,并且選用手藝洗板,孔與孔之間液體交叉。
選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量缺少,致使洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,致使洗板效果差。
反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺制造標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計(jì)算出不知道樣品中抗體或抗原的濃度。
EISA試劑盒實(shí)驗(yàn)合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。


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