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ELISA實(shí)驗出現(xiàn)花板無梯度背景高的原因

閱讀:2417發(fā)布時間:2017-4-12

                    ELISA實(shí)驗出現(xiàn)花板無梯度背景高的原因

ELISA實(shí)驗花板無梯度背景高
在完成所有實(shí)驗步驟進(jìn)行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中的孔有顏色但沒有梯度,背景也可能較高,。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
底物溶液TMB未置于陰涼避光處保存,實(shí)驗前溶液已經(jīng)變藍(lán)。
孵育溫度過高或者孵育時間過長,發(fā)生了較強(qiáng)的非特異性吸附。
沒有按說明書要求洗板,特別是洗板時洗滌液的量少加了。
加樣時沒有換槍頭造成交叉污染。
花板現(xiàn)象:低濃度或者低活性的包被抗體或者檢測抗體,封閉不足導(dǎo)致的本底不穩(wěn)定,洗板不充分,包被板子的問題。


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