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ELISA實驗操作注意事項有哪些禁忌

閱讀:1717發(fā)布時間:2017-7-24

酶聯(lián)免疫吸附試驗ELISA試劑盒因其操作簡略,靈敏度高,特異性好,經(jīng)濟安全等特色而在臨床上廣泛應(yīng)用,可是因為其操作進程雜亂,一般包含試劑預(yù)備,樣本收集,加樣,溫育,洗刷,顯色,比色,成果判定等,其間任何一項操作不妥都會對檢查成果發(fā)生很大影響。

因而,必須加強ELISA檢查的全部質(zhì)量操控,保證其成果的牢靠。Elisa試驗成果的影響要素包含檢查樣品要素、操作要素等。在試驗操作的進程中有一些技能關(guān)鍵。

 

ELISA試劑盒操作
1、加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。按闡明進程嚴(yán)厲操控操作時刻,防止孵育時刻人為延伸,致使非特異性緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
2、作時必須戴手套,穿作業(yè)衣,嚴(yán)厲健全和執(zhí)行消毒隔離準(zhǔn)則。
3、剩下樣品及拋棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后拋棄。
4、同批號試劑組分不得混用。
5、在運用微量加樣器時,汲取不一樣瓶子中液體后要更換槍頭,即便汲取規(guī)范品溶液。
6、汲取液體時
速度不易太快,防止發(fā)生氣泡,汲取的量不行。
7、手工洗板時每次參加洗刷液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗刷液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止穿插污染。甩去洗刷液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
8、洗刷時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
9、每次試驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,僅僅zui終加底物溶液及2N H2SO4。丈量時先用此孔調(diào)OD值至零。
10、要保證微量加樣器的性,能夠運用蒸餾水和電子天平進行斷定(因為蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水能夠看作是lg、200 L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進行斷定。
11、底物為TMB,防止與肌膚相觸摸。停止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量防止觸摸肌膚。
ELISA檢查操作進程雜亂,ELISA試劑盒可能會影響測定成果的要素較多,分布在測定操作的各個進程中,因而必須加強各環(huán)節(jié)的質(zhì)量操控,才干得到牢靠的檢查成果。

 

 

 

 


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