中文名稱:兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa試劑盒
英文名稱:Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 elisa kit
操作程序:
① 加抗體包被 → 4℃**,洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa試劑盒選擇
◎試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價。
◎靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
◎特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
◎精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。
◎準(zhǔn)確度:通過添加回收實驗進(jìn)行評價。
◎簡便性:指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
◎安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
◎經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,而市場價格比較合理。
◎試劑評價:需要有的確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測。
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
血清
操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g 離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿
EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液
1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿
將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
保存
如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍