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兔子睪酮(T)elisa試劑盒標本的保存方法:
血清標本宜在新鮮時檢測.如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應.如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存.凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測.反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存.保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑.
兔子睪酮(T)elisa試劑盒實驗過程中加樣可能碰到的問題:
1.過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);
2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間;
3.加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標本分離不好即進行加樣。
相應解決辦法:
1.標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2.加樣后及時放入孵箱。
3.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4.如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5.標本較多時,請分批操作。
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